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幼蚊細胞;C6/36的培養細胞的運輸方法
2018-12-6 閱讀(133)
提 供 商 | 上海邦景實業有限公司 | 資料大小 | 15.5KB |
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資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數 | 133次 |
培養細胞的運輸
裝運細胞的方法有兩種,一種為冷凍儲存運輸,即利用特殊容器內盛液氮或干冰凍存, 保存效果較好,但較麻煩,且不宜長時間運輸,多需空運。另一種簡單的方法為充液法,
步 驟如下: [1] 選擇生長狀態良好的細胞,可直接根據路程時間來選擇接種細胞數量,一般以長滿 1/3—1/2 瓶底壁為宜,去掉舊培養液,補充新的培養液到達瓶頸部,保留微量空氣, 擰緊瓶蓋,瓶口用膠帶密封。
[2] 妥善包裝運送,并用棉花等做防震防壓處理。4—5 天可以到達目的地者一般放在貼身 口袋即可,到達目的地后倒出多余的培養液,僅保留維持細胞生長所需液量。37℃培 養,次日傳代。
[3] 如果距離很近,如在統一城市內或數小時路程,也可將細胞附著面朝上,或把培養液 全部倒掉放在胸bu口袋進行運送。僅靠附著于細胞表面的培養液,可使細胞短時間不 致受損。
多藥耐藥細胞的培養 多藥耐藥(Multidrug Resistance, MDR)是指腫瘤細胞接觸某一藥物,不僅對 此種藥物產生耐藥性,而且對其他結構和功能不同的抗腫瘤藥物也產生交叉耐藥性的現 象,是造成失敗的主要原因。
耐藥指數(RF)=某種藥物針對抗藥性細胞的 IC50/某種藥物針對敏感性細胞的 IC50。 逆轉指數(reverse index, RI)=不加逆轉劑時某種藥物針對抗藥性細胞的 IC50/加入逆 轉劑后某種藥物針對抗藥性細胞的 IC50。 體外低濃度梯度遞增聯合大劑量間斷沖擊方法誘導腫瘤細胞對特定細胞產生耐藥性。
第二節 細胞培養污染的檢測和排除 組織培養細胞被有害物污染是組織培養工作的大敵。應用組織培養進行研究工作,除需 要好的實驗設計和技術方法外,成敗的關鍵還在于能否避免污染。一項好的研究,或建成的滿 意細胞系,往往由于遭受污染而前功盡棄。
因此,一個組織培養工作者,要始終注意防止污染。 培養細胞被污染,人們注意的是真菌、細菌和病毒等微生物。現在看來已經不夠,當 前“污染”一詞的概念應該是,凡混入培養環境中對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異 物,都應視為污染。
從這一概念考慮,組織培養污染應包括以下幾個方面: 微生物:真菌、細菌、支原體和病毒 化學物質:影響細胞生存的非細胞所需的化學成分 細胞:非同種的其它細胞 當然在培養中以微生物污染為多見,化學污染較少;
但近年隨細胞種類增多,不同種細 胞交叉污染卻屢有發生,以致在 ATCC 接受入庫細胞中特設同工酶檢測一項,目的在于證明 是否有 HeLa 等細胞的交叉污染。但細胞交叉污染只要工作細心,是容易防止的,而微生物 污染在實際工作中卻是難防止和易發生的。