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上海邦景實業有限公司
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人正常肺上皮細胞購買注意事項
2018-12-4 閱讀(159)
| 提 供 商 | 上海邦景實業有限公司 | 資料大小 | 14KB |
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| 資料圖片 | 【點擊查看】 | 下載次數 | 20次 |
| 資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數 | 159次 |
購買上海邦景物細胞注意事項（邦景生物）發布
一、客戶收到細胞先不開蓋，放在培養箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議受收細胞時的培養基拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；
收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
二、如為貼壁細胞，請在顯微鏡下觀察細胞密度：
1. 未超過80%匯合度時，用75%酒精（建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水，噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作；然后打開蓋子，先用槍頭把培養基吸出10ml左右，放在離心管里，然后瓶口過火（嚴禁直接傾倒），這樣可以保證不污染，再用10ml的移液管，將剩余的培液全部吸出，放于離心管中，培養瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養16hr(時間根據細胞生長情況調整）之后，傳代或者凍存。
2. 超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。具體步驟如下：
1) 棄去培養液，用3ml PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次；
2) 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于T25培養瓶中，倒轉放于37度培養箱1-3分鐘預熱，然后又將培養瓶倒轉大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養培養瓶，細胞隨即脫落下來；
3) 加入6-8ml*培養基，吸出，分到新的培養瓶中，按要求分瓶。
三、如為懸浮細胞，吸出培養液，1000轉/分鐘離心5分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
注意：換液時一半用我們的培養基，一半用你們的，以免細胞不適應而造成生長不好。
