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上海邦景實業有限公司
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上皮細胞株體制備方法步驟
2018-4-16 閱讀(889)
上皮細胞株體制備方法步驟
（1）秋水仙素處理：取骨髓前3h先給小鼠腹腔注入秋水仙素，注射劑量為100μg／kg動物體重。
（2）取骨髓：用損傷脊髓法處死小鼠，然后用剪刀剪開大腿上的皮膚和肌肉，取出大腿骨，用一小塊紗布搓干凈附在骨上的肌肉碎渣。剪掉股骨兩端膨大的關節頭，然后用注射器吸取5ml 0.85％生理鹽水，插入股骨一端，將骨髓細胞沖洗至10ml的離心管中。可重復沖洗多次，直至骨髓腔呈白色為止。
（3）低滲處理：將所獲得的細胞懸浮液以 1000rpm離心10min，吸去上清液，留0.2ml沉淀物，加0.075mol/L KCL 溶液（37℃）至8ml刻度，將細胞沉淀物吹散打勻，在37℃水浴低滲25min。
（4）固定：低滲處理后，立即加入1ml新配制且預冷的固定液，抽打均勻，然后1000 rpm離心10min，棄上清。沿管壁加固定液至6ml， 吹散細胞后靜止固定10min，即*次固定。按上述條件離心，去上清液，再次加入固定液至6ml，進行第二次固定。10min后離心吸去上清液，留0.2ml沉淀物，再往沉淀物中滴加4滴固定液，沖勻制成細胞懸液。
（5）滴片：取事先在冰箱中預冷的載玻片，從約15cm高處向每個載玻片上滴1～2滴細胞懸液于粘有冰水的載玻片上，晾干。
（6）染色：取制片平放在玻璃板上，用1∶9 Giemsa染液染色20min，流水沖洗后晾干。
（7）觀察：小白鼠染色體的形態特征，并計算2n的染色體數目。
上皮細胞株5 x 10^5 cells/vial 大鼠星形膠質細胞 RA
5 x 10^5 cells/vial 大鼠小腦星形膠質細胞 RA-c
5 x 10^5 cells/vial 大鼠海馬趾星形膠質細胞 RA-h
5 x 10^5 cells/vial 大鼠小膠質細胞 RM
5 x 10^5 cells/vial 大鼠淋巴成纖維細胞 RLF
5 x 10^5 cells/vial 大鼠肺泡上皮細胞 RPAEpiC
5 x 10^5 cells/vial 大鼠腎小管上皮細胞 RRTEpiC
5 x 10^5 cells/vial 大鼠肝星形細胞 RHSteC
1 x 10^6 cells/vial 大鼠心肌細胞 RCM
5 x 10^5 cells/vial 大鼠間充質干細胞-骨髓 RMSC
5 x 10^5 cells/vial 小鼠垂體細胞 MPC
5 x 10^5 cells/vial 小鼠腦膜細胞 MMenC
1 x 10^6 cells/vial 小鼠腦脊神經元 MN-r
1 x 10^6 cells/vial 小鼠黑質神經元 MN-sn
1 x 10^6 cells/vial 小鼠紋狀體神經元 MN-s
1 x 10^6 cells/vial 小鼠海馬趾神經元 MN-h
1 x 10^6 cells/vial 小鼠皮質神經元 MN-c
1 x 10^6 cells/vial 小鼠顆粒細胞 MGC
1 x 10^6 cells/vial 小鼠腹脊髓神經元 MN-vsc
1 x 10^6 cells/vial 小鼠背脊髓神經元 MN-dsc
5 x 10^5 cells/vial 小鼠少突膠質前體細胞 MOPC
5 x 10^5 cells/vial 小鼠雪旺細胞 MSC
5 x 10^5 cells/vial 小鼠周神經成纖維細胞 MPNF
5 x 10^5 cells/vial 小鼠星形膠質細胞 MA
5 x 10^5 cells/vial 小鼠小腦星形膠質細胞 MA-c
5 x 10^5 cells/vial 小鼠海馬趾星形膠質細胞 MA-h
5 x 10^5 cells/vial 小鼠小膠質細胞 MM
1 x 10^6 cells/vial 小鼠巨噬細胞 MMa
5 x 10^5 cells/vial 小鼠淋巴成纖維細胞 MLF
5 x 10^5 cells/vial 小鼠腎小管上皮細胞 MREpiC上皮細胞株
