大鼠Toll樣受體4 TLR4 酶聯(lián)免疫試劑盒【工作原理】
Toll樣受體(Toll-1ike receptor,TLRs)是一種模式識別受體,識別病原微生物進化中保守分子,如脂多糖(LPS)、肽聚糖、酵母多糖以及病原微生物的核酸等。TLRs是一個受體家族,在人中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)10個成員,即TLR1-10。TLR4介導(dǎo)的胞內(nèi)信號傳遞涉及幾種通路,但zui終都要激活NF-κB或MAPK作用。zui近報道,和正常小鼠相比,TLR4缺乏的小鼠周圍神經(jīng)損傷后異常性疼痛的程度降低。而反義寡核苷酸阻滯脊髓背角TLR4表達(dá)可以減緩機械性超敏反應(yīng)。小膠質(zhì)細(xì)胞中TLR4在周圍神經(jīng)損傷后的小膠質(zhì)細(xì)胞活化中也同時出現(xiàn)。反義寡核苷酸減低脊髓背角TLR4表達(dá)的同時CR3的表達(dá)和小膠質(zhì)細(xì)胞的活化也受到了抑制因此,脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞中TLR4是周圍神經(jīng)損傷后小膠質(zhì)細(xì)胞活化的關(guān)鍵介質(zhì),TLR4也為神經(jīng)病理性疼痛的預(yù)防和治療提供了一個新的方案。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)*(biotin)標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
大鼠Toll樣受體4 TLR4 酶聯(lián)免疫試劑盒【每套試劑盒中內(nèi)容】(96T)
材料 數(shù)量
大鼠TLR4標(biāo)準(zhǔn)品 96T(2vial)
預(yù)包被大鼠TLR4抗體的96孔板 96T(8×12)
*標(biāo)記大鼠TLR4抗體 96T (1:100)
ABC(親和素-過氧化物酶復(fù)合物) 96T (1:100)
樣品稀釋液 96T×2
大鼠TLR4抗體稀釋液 96T×1
ABC稀釋液 96T×1
TMB顯色液A 96T×1
TMB顯色液B 96T×1
TMB終止液 96T×1
ELISA洗滌液 96T×1(1:25)
【需要而未提供的試劑和器材】
1. 37℃恒溫箱。
2. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
3. 自動洗板機。
4. 單通道或多通道可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭。
5. 蒸餾水,容量瓶等
6. 干凈的試管和Eppendof管。