大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 TRFR 酶聯(lián)免疫試劑盒【工作原理】
TRFR,轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(transferrin receptor)。轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TfR)是一種細(xì)胞膜受體,也是一種跨膜糖蛋白。主要在調(diào)節(jié)細(xì)胞鐵的攝取中發(fā)揮關(guān)鍵作用。正常人80%以上的TfR存在于骨髓紅系細(xì)胞上,紅系各階段細(xì)胞所表達(dá)的TfR數(shù)隨紅細(xì)胞的成熟而減少。原紅細(xì)胞上可有800,000個(gè)TfR,到網(wǎng)織紅細(xì)胞逐漸減少。原紅細(xì)胞上可有100,000個(gè),成熟紅細(xì)胞上則無TfR。sTfR的數(shù)目可反映體內(nèi)鐵的利用狀況,在鐵代謝正常時(shí)亦可反映骨髓紅系的增殖情況,故在缺鐵性貧血、溶血性貧血時(shí)sTfR是增高的,而在再生障礙性貧血及慢性病貧血,sTfR是減少的。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)*(biotin)標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān)。
大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 TRFR 酶聯(lián)免疫試劑盒【每套試劑盒中內(nèi)容】(96T)
材料 數(shù)量
大鼠TRFR標(biāo)準(zhǔn)品 96T(2vial)
預(yù)包被大鼠TRFR抗體的96孔板 96T(8×12)
*標(biāo)記大鼠TRFR抗體 96T (1:100)
ABC(親和素-過氧化物酶復(fù)合物) 96T (1:100)
樣品稀釋液 96T×2
大鼠TRFR抗體稀釋液 96T×1
ABC稀釋液 96T×1
TMB顯色液A 96T×1
TMB顯色液B 96T×1
TMB終止液 96T×1
ELISA洗滌液 96T×1(1:25)
【需要而未提供的試劑和器材】
1. 37℃恒溫箱。
2. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
3. 自動(dòng)洗板機(jī)。
4. 單通道或多通道可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭。
5. 蒸餾水,容量瓶等
6. 干凈的試管和Eppendof管。
【注意事項(xiàng)】
1. 從-20℃取出的試劑盒,在4℃解凍過夜。盒內(nèi)每一瓶解凍的溶液在開啟瓶蓋之前都要輕輕搖勻,避免解凍時(shí)出現(xiàn)的分層,否則會(huì)出現(xiàn)濃度不均一的現(xiàn)象。
2. 開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。
3. 配制各種試劑時(shí),切記混勻!
4. 用戶在初次使用試劑盒時(shí),應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。
5. 建議所有大鼠TRFR標(biāo)準(zhǔn)品、樣本都做雙份檢測(cè)。
6. 要嚴(yán)格避免操作過程中酶標(biāo)板干燥。干燥會(huì)使酶標(biāo)板上生物成份迅速失活!
7. 為免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和試管。