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上海研伴實業有限公司
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登革熱試劑盒廠家提供詳細的實驗步驟,試劑準備的信息。
登革熱試劑盒是由一種酶聯擴大的兩步法免疫檢測系統。在此實驗中，將登革熱陰性質控、陽性質控和未知濃度的血清樣品用樣品稀釋液稀釋，然后加入到包被 了抗人IgM抗體的微孔中溫育，之后分別加入登革熱源性重組抗原DENVRA和正常細胞抗原（NCA）進行溫育。溫育并洗板后，用HRP標記的DEN特異 性抗體處理。第二次溫育并洗板后，加入TMB底物液進行溫育。之后再加入酸性終止液，450nm處測OD值可確定底物反應的程度。當高于一定數值時（臨界 值），樣品的吸光度值可確定樣品中是否存在登革熱抗體。
登革熱試劑盒樣品的采集與準備：
1）此實驗必須用血清來做。全血和血漿樣本不能直接檢測。
2）不要將不同批次的試劑混亂
3）不要加熱熱滅活的試驗血清
4）實驗前將所有試劑平衡至室溫，溫度的改變會對試驗有影響
5）避免反復凍融樣品血清
6）直接用干凈的槍頭從試劑瓶中移去試劑，不能轉移，避免污染
7）不用的板條應立即放回至密封袋中保存
8）不要使用任何過期的試劑
9）避免試劑暴露受熱或陽光直射
10）有些試劑可能會產生沉淀，使用前一定要混勻
11）洗滌過程不完整會對試驗結果產生影響
12）為了減少由于孵育時間的差異而引起的漂移，建議底物液和終止液加入的時間和速度要*
13）避免試劑中有微生物污染，尤其是酶聯物
14）每一次吸取試劑，標準品，質控品時都應用干凈的槍頭
實驗步驟：
將所有的試劑成分和樣品都平衡至室溫。實驗前反復倒置以混合試劑和樣品。
試劑準備：
1）1X洗滌液的配制：用生物學或高純度水將10倍濃縮型的洗滌液稀釋成1X的洗滌液。為了制備即用型的洗滌緩沖 液，我們可以將120ml 10倍濃縮的洗滌液加入到1080ml蒸餾水或去離子水中，沖洗掉所有晶體，旋渦混合溶液以至所有晶體都溶解掉。制備好的洗滌液可在室溫下穩定儲存6個月。使用前請檢查洗滌液是否被污染。
2）包被板的準備：將實驗所需數目的板條置于板架上。將剩余的板條立即裝入包裝袋中，并儲存于2-8℃的環境下，有效期內穩定。
用于定性檢測血清中登革病毒（血清型1、2、3及4型）的IgG抗體，用于臨床實驗室對具有持續發燒的登革感染癥狀或接觸史的患者的輔助性診斷。
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