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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

人子宮成纖維分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時，可以引起子宮脫垂。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的子宮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。子宮成纖維細(xì)胞的主要特征：①是子宮的重要細(xì)胞組成，在體外易于培養(yǎng)；②在子宮損傷后能修復(fù)和重塑子宮；③在子宮炎癥時能控制炎癥擴(kuò)散。

方法簡介：

公司實驗室分離的人子宮成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人子宮成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。

?細(xì)胞計數(shù)?：使用血細(xì)胞計數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠鐵蛋白(FE)ELISA 試劑盒 96T/48T

Siated muscle actinin alpha (SM Actinin- a) ELISA Kit 大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )ELISA試劑盒

Humanmannosereceptor,MRELISAKit 人甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA試劑盒雞轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞RUNX3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MouseFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISAKit小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠特異生長因子elisa試劑盒   小鼠特異生長因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠特異生長因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠特異生長因子試劑盒、小鼠特異生長因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠壞死因子elisa試劑盒   小鼠壞死因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠壞死因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠壞死因子試劑盒、小鼠壞死因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠總補(bǔ)體elisa試劑盒   小鼠總補(bǔ)體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠總補(bǔ)體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠總補(bǔ)體試劑盒、小鼠總補(bǔ)體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠總腺原酸elisa試劑盒   小鼠總腺原酸試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠總腺原酸試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠總腺原酸試劑盒、小鼠總腺原酸elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

大鼠微粒體S轉(zhuǎn)移酶2(MGST2)ELISA試劑盒 ，英文名： MGST2 ELISA Kit

Niu Bingtong (acetone) ELISA kit for the detection 牛檢測(acetone)ELISA試劑盒

Ratnicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISAKit 大鼠腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHPV-IgG(HumanpapillomavirusIgG)ELISAKit人狀瘤病毒抗體IgG規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞P38β2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitAβ1-40大鼠β淀粉樣蛋白1-40規(guī)格：48T/96T

HA重組甲型流感 H16N3 (A/black-headed gull/Sweden/5/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

SCF (Stem Cell Factor 0.5mgSCF (Stem Cell Factor) 干細(xì)胞生長因子抗原

REG4重組人 REG4 / RELP / GISP 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CGA Protein Human 重組人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

IL1RL1 Protein Human 重組人 IL1RL1 / DER4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

人子宮成纖維細(xì)胞SCF (Stem Cell Factor 0.5mgSCF (Stem Cell Factor) 干細(xì)胞生長因子抗原

CGA Protein Human 重組人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H16N3 (A/black-headed gull/Sweden/5/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IL1RL1 Protein Human 重組人 IL1RL1 / DER4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

REG4重組人 REG4 / RELP / GISP 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。