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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

人主動脈平滑肌分離自主動脈組織；主動脈是體循環(huán)的動脈主干。其運行路徑為：升主動脈起于左心室，至右側(cè)第2胸肋關(guān)節(jié)高度移行為主動脈弓，弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈；在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈，以上為胸主動脈，至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動脈；髂總動脈在骶髂關(guān)節(jié)高度分為髂內(nèi)、外動脈。主動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。主動脈平滑肌細(xì)胞在心血管疾病發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用，以主動脈平滑肌細(xì)胞為實驗研究對象，探討心血管疾病相關(guān)發(fā)病機(jī)制是目前研究的熱點；體外培養(yǎng)的主動脈平滑肌細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡介：

公司實驗室分離的人主動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人主動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。

?細(xì)胞計數(shù)?：使用血細(xì)胞計數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠銅藍(lán)蛋白(CP/CER)ELISA 試劑盒 96T/48T

Kappa B subunit p65 factor - nucleus of rat affinity peptide (NF- kappa B p65) ELISA Kit 大鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒

Humanserineprotease,PRSSELISAKit 人絲蛋白酶(PRSS)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISA試劑盒雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞PI-3KINASEP110BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MouseFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit小鼠Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠同型半胱酸(Hcy)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠鐵調(diào)素(Hepcidin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠天門冬酸基轉(zhuǎn)移酶（AST）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠組蛋白H2B(H2B)ELISA試劑盒 ，英文名： H2B ELISA Kit

Nude mouse alpha fetoprotein / alpha fetoprotein (AFP) ELISA Kit 裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒

MouseProcalcitonin,PCTELISAKit 小鼠降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3規(guī)格：48T/96T

土壤元素比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitAMA大鼠抗心肌抗體規(guī)格：48T/96T

MDH1重組大鼠 MDHA / MDH1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

HCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen 0.5mgHCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen)human 膀胱抗原

CD160重組人 CD160 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CFHR2 Protein Human 重組人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CSRP1 Protein Mouse 重組小鼠 CSRP1 / CSRP / CRP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人主動脈平滑肌細(xì)胞HCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen 0.5mgHCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen)human 膀胱抗原

CFHR2 Protein Human 重組人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

MDH1重組大鼠 MDHA / MDH1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CSRP1 Protein Mouse 重組小鼠 CSRP1 / CSRP / CRP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD160重組人 CD160 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。