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原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關)，再加上取材，成本等因素，通常會把培養的第一代到第十代以內的細胞統稱為原代細胞。

人乳腺癌成纖維細胞

商品屬性：

細胞簡介：

人乳腺癌成纖維分離自患有乳腺癌的女性乳腺組織；女性乳腺是由皮膚、纖維組織、乳腺腺體和脂肪組成的，乳腺癌是發生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤。乳腺癌中99%發生在女性，男性僅占1%。乳腺并不是維持機體生命活動的重要器官，原位乳腺癌并不致命；但由于乳腺癌細胞喪失了正常細胞的特性，細胞之間連接松散，容易脫落。癌細胞一旦脫落，游離的癌細胞可以隨血液或淋巴液播散全身，形成轉移，危及生命。目前，乳腺癌已成為威脅女性身心健康的常見腫瘤。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的乳腺癌成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介：

公司實驗室分離的人乳腺癌成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質量檢測：

公司實驗室分離的人乳腺癌成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數的細胞能夠度過“危機"而繼續傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質發生了改變且帶有癌變的特點，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養物經傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續傳代的培養細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養、種類多、價格便宜、無限傳代等優點，也非常容易在培養、凍存中發生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產品：

小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat secretory immunoglobulin A (sIgA) ELISA Kit 大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒

HumanCholicacidELISAKit 人膽酸(Cholicacid)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

rabbitTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISA試劑盒兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

油類高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次

MouseIerferonγ,IFN-γELISAKitKit小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒規格：96T/48T

小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠白介素10(IL-10)ELISAKIT   ELISA.   96T/48T

小鼠白介素11(IL-11)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

中文名稱   方法   規格

大鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1)ELISA試劑盒 ，英文名： MCP-1 ELISA Kit

Porcine apolipoprotein B100 (apo-B100) ELISA Kit 豬載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠抗利尿激素/血管加壓素(mouse AVP/ADH) 48T/96T 進口分裝

CLIAKitforLPAb-IgA(HumanLegionellaaibodyIgA)ELISAKit人軍團菌抗體IgA規格：48T/96T

通用型DNA克隆試劑盒(不包括內切酶)10次

ELISAKitIL-1雞白介素1規格：48T/96T

POSTN重組人 Periostin / POSTN 蛋白 (His 標簽) Protein

胰島素樣生長因子2(IGF2)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor 2 (IGF2)

NA重組甲型流感 H5N1 神經酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein

CD40 Protein Human 重組人 CD40 / TNFRSF5 蛋白 (His 標簽)

FLAA Protein M.viridifaciens 重組單核細胞增生李斯特菌 flagellin / flaA 蛋白 (His 標簽)

人乳腺癌成纖維細胞胰島素樣生長因子2(IGF2)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor 2 (IGF2)

CD40 Protein Human 重組人 CD40 / TNFRSF5 蛋白 (His 標簽)

POSTN重組人 Periostin / POSTN 蛋白 (His 標簽) Protein

FLAA Protein M.viridifaciens 重組單核細胞增生李斯特菌 flagellin / flaA 蛋白 (His 標簽)

NA重組甲型流感 H5N1 神經酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein

原代細胞培養的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養液。

7、計數：用計數板計數，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養液調整后，分裝入培養瓶中。對大多數細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調整。

8、培養：置于37℃溫箱培養，如用CO2溫箱培養，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。