細(xì)胞:PC-3細(xì)胞
中文名稱:人前列腺癌細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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類禽H1N1豬流感恐引發(fā)大規(guī)模人流感
流感病毒重要宿主是豬。主要流行兩種H1N1流感病毒在豬群中:經(jīng)典H1N1豬流感病毒、H1N1豬流感病毒。
經(jīng)典H1N1豬流感病毒1918年進(jìn)入豬群,通過長期進(jìn)化重組,2009年在北美進(jìn)入人群并引發(fā)全球人流感大流行,被稱為甲型H1N1流感。
H1N1流感病毒1979年在歐洲由禽類傳入豬群,隨后在歐洲和亞洲很多國家的豬群中流行,在歐洲和中國都有人感染發(fā)病的報(bào)告,其中在中國有一個死亡病例。
2010年,他們對豬流感進(jìn)行了系統(tǒng)監(jiān)測,從3.6萬多頭豬中分離出228株流感病毒,其中139株是H1N1豬流感病毒,說明H1N1豬流感病毒在中國的豬群中廣泛存在。
科研人員對這些病毒進(jìn)行系統(tǒng)的遺傳學(xué)和生物學(xué)研究發(fā)現(xiàn), H1N1豬流感病毒在遺傳學(xué)上形成多樣性,病毒都已獲得感染人的能力,大多數(shù)病毒具備了在人群中高效傳播的能力,而目前使用的人流感疫苗(vaccine)和人群現(xiàn)有免疫力不能針對這些病毒為人體提供足夠保護(hù)。
從動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果看,H1N1豬流感病毒的致病力與2009年引發(fā)甲型H1N1流感的病毒類似。
通過對動物中的主要流感病毒H1N1、H3N2、H5N1、H7N9、H9N2及H1N1豬流感病毒進(jìn)行科學(xué)分析和綜合比較,他們認(rèn)為,“H1N1豬流感病毒是引起下次人流感大流行可能性最大的病毒,應(yīng)予以高度重視”。
過去100年里,動物流感病毒直接或間接先后導(dǎo)致全球4次人流感大流行,分別是1918年的H1N1大流感、1957年的H2N2大流感、1968年的H3N2大流感和2009年的H1N1甲流。