細胞:SK-LU-1細胞
中文名稱:人低分化肺腺癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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在細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑(CKI)p27或p21基因敲除的小鼠中發現,p21和p27分別作用于細胞周期G1晚期和S期,可調節干細胞休止和再生能力;
去除G1早期的抑制物p18,可增加造血干細胞增殖能力,并且明顯增加了干細胞的自我更新能力。
進一步研究發現,CKI介導的細胞周期調控也存在于神經干細胞中,提示CKI在其他組織干細胞周期調控中也扮演著至關重要的角色。
這些研究為干/祖細胞特異性細胞周期調控提供了新的靶向,也為體外干細胞的誘導、分化提供了新的線索。
科研人員進行了干細胞分化調控新基因的篩選及其功能研究。他們利用抑制性消減雜交技術(SSH)構建了Lin-CD34-和Lin-CD34+細胞的差異表達基因的cdna文庫,發現了Humanin基因,該基因對神經細胞的凋亡具有保護作用,在髓系造血祖細胞K562中具有延緩凋亡和抑制分化的作用,在Lin-CD34-細胞中的高表達提示該基因可能參與造血干細胞自我更新能力的維持。
他們克隆并命名的人新基因Spindlin1(AF317228)可能參與人胚胎的早期發育,有可能在腫瘤的發生中發揮重要作用。
目前,他們正對人10號染色體長臂上的兩個新基因——N-RAP和MOB進行克隆與功能研究。這些研究可以使人們獲得越來越多的與干細胞增殖與分化過程相關的新的功能基因,對這些基因的深入研究將有助于闡明干細胞增殖與分化的調控機制。(人MDA-MB-134Ⅵ細胞 來源:通派細胞庫 人乳導管癌細胞
人H2087細胞 來源:通派細胞庫 人非小細胞肺腺癌細胞)
ASC移植的總體目標是建立ASC增殖和誘導分化的技術平臺,獲得大量多能或組織干細胞,用于相關病人的移植治療,相信隨著研究的不斷深入,干細胞移植治療多種疾病將不再是一個夢想!