生物實驗中培養細胞的步驟至關重要，江蘇菲亞生物科技的研究人員通過每次的實驗總結出培養細胞常用的固定劑和固定方法。常用的培養細胞常用固定劑有4％多聚甲醛磷酸緩沖液、丙酮、甲醇和95％乙醇。在固定之前需用37℃預熱的PBS輕洗細胞。

    1．4％多聚甲醛磷酸緩沖液  固定10―20分鐘，干燥。

    2．甲醇  10‰甲醇固定5―20分鐘，自然干燥。

    3．丙酮  4℃冷丙酮固定組織穿透性和脫水性強，抗原保存好，很少用于組織切片，常用于培養細胞和細胞涂片的固定，平時丙酮4℃低溫保存備用，臨用時，將載玻片插入冷丙酮內5～10分鐘，取出后自然于燥。

    4．乙醇  95％乙醇脫水性強，易引起組織收縮、變硬，影響切片質量，因而固定時間不宜過長(2小時內)。乙醇使蛋白變性程度輕，固定后蛋白 可再溶解，在染色中孵育時間長的情況下，抗原可流失，并減弱反應強度。

    5．乙醚(或三lu甲烷)  與乙醇等量混合對組織穿透性*，即使涂片上含較多的黏液，固定效果仍較好，是理想的細胞固定液。

    培養細胞固定之后晾干可使細胞牢固地黏附在載玻片上，故對于容易脫落的細胞應延長晾干時間。晾干之后PBS漂洗3次，然后進行組織化學或免疫組織化學染色。

    用于免疫組織化學的固定劑種類很多，不同的抗原和標本均可醛類固定液，如效果不佳，再試用其他固定液。選擇固定液的標準：一是能地保持組織細胞的形態結構；二是zui大限度地保存抗原免疫活性和被檢物不被丟失。一些含重金屬固定液可用于組織化學標本的固定，但在免疫組織化學染色中禁用。