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人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA檢測試劑盒實驗所涉及到的儀器如下:
1、酶 標 儀
酶標比色儀介紹:
酶標比色儀簡稱酶標儀,通常指于測讀ELISA結果吸光度的光度計。針對固相載體形式的不同,各有特制的適用于板、珠和小試管的設計。許多試劑公司配套供應酶標儀。酶標儀的主要性能指標有:測讀速度、讀數的準確性、重復性、精確度和可測范圍、線性等等。優良的酶標儀的讀數一般可精確到0.001,準確性為lusm1%,重復性達0.5%。舉例說,若某孔測得的A值為1.083,則該孔相對于空氣的真實A值應為1.083lusm0.01(1.073~1.093),復測定數次,其A值均應1.083lusm0.05(1.078~1.088)在之間。酶標儀的可測范圍視各酶標儀的性能而不同。普通的酶標儀在0.000~2.000,新型號的酶標儀上限拓寬達2.900,甚至更高。超出可測上限的A值常以"*"或"over"或其它符號表示。應注意可測范圍與線性范圍的不同,線性范圍常小于可測范圍,比如某一酶標儀的可測范圍為0.000~2.900,而其線性范圍僅0.000~2.000,這在定量ELISA中制作標準曲線時應予注意。
酶標儀不應安置在陽光或強光照射下,操作時室溫宜在15~30℃,使用前先預熱儀器15-30分鐘,測讀結果更穩定。
測讀A值時,要選用產物的敏感吸收峰,如OPD用492nm波長。有的酶標儀可用雙波長式測讀,即每孔先后測讀兩次,*次在zui適波長(W1),第二次在不敏感波長(W2),兩次測定間不移動ELISA板的位置。例如OPD用492nm為W1,630nm為W2,zui終測得的A值為兩者之差(W1-W2)。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。各種酶標儀性能有所不同,使用中應參考對應儀器說明書。
2、洗 板 機
3、離 心 機
4、培 養 箱
操作步驟
實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。ZK-M5508 小鼠泛素結合酶E2A(UBE2A)ELISA檢測試劑盒 mouse Ubiquitin Conjugating Enzyme E2A (UBE2A) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
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ZK-M5511 小鼠染色框同源物3(CBX3)ELISA檢測試劑盒 mouse Chromobox Homolog 3 (CBX3) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-M5512 小鼠核仁素(NCL)ELISA檢測試劑盒 mouse Nucleolin (NCL) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-M5513 小鼠核仁磷酸蛋白(NPM)ELISA檢測試劑盒 mouse Nucleophosmin (NPM) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-M5514 小鼠2',5'-寡腺苷酸合成酶1(OAS1)ELISA檢測試劑盒 mouse 2',5'-Oligoadenylate Synthetase 1 (OAS1) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-M5515 小鼠神經纖維網蛋白1(NRP1)ELISA檢測試劑盒 mouse Neuropilin 1 (NRP1) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-M5516 小鼠血管抑素(ANG)ELISA檢測試劑盒 mouse Angiostatin (ANG) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-M5517 小鼠周期素依賴性激酶抑制因子1A(CDKN1A)ELISA檢測試劑盒 mouse Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 1A (CDKN1A) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
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