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人肝細胞生長因子(HGF)ELISA檢測試劑盒

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更新時間:2020-05-12 16:53:06瀏覽次數(shù):548次

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人肝細胞生長因子(HGF)ELISA檢測試劑盒
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人肝細胞生長因子(HGF)ELISA檢測試劑盒操作步驟
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。

客戶購買子科生物試劑盒須知:
1、子科生物所提供的試劑產(chǎn)品,均為科研試劑,僅供科研使用,不得用于注射、藥品、食用,血更不能用于臨床檢測和動物防疫檢測或其他用途,對此造成的任何利潤與損失、間接損失、損害承擔責任經(jīng)濟糾紛,我司不承擔任何責任。
2、買方在提貨或收貨時,請仔細檢查貨物包裝,如發(fā)現(xiàn)包裝破損,應拒收或拍照取證,隨后轉(zhuǎn)發(fā)給我司,買方一旦簽收,我司將不對產(chǎn)品的包裝狀態(tài)負責;買方收到貨品后,應及時清點,若發(fā)現(xiàn)貨物短缺,應于簽收當天通知我司,若簽收次日我司尚未收到買方通知,則視為買方確認無短缺。
3、我們向您保證我們提供的產(chǎn)品均經(jīng)過鑒定為合格產(chǎn)品,如果真的有任何質(zhì)量問題,請您在收到產(chǎn)品1個月內(nèi)以書面的形式及時通知我司,超過時間不予受理,我們將給您提供*周到及時的技術(shù)售后處理。

結(jié)果判斷
1、30分鐘內(nèi)在波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值;
2、以O(shè)D值為縱坐標,以標準品的濃度為橫坐標,繪制曲線圖;
3、根據(jù)樣品的OD值查找對應的濃度范圍;

標本要求: 
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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