人促黃體激素(LH)ELISA檢測試劑盒子科生物免費代測,2016年年中*!進行詢價,全場可以享受7折優惠!并可享受滿減活動,滿10000減1000,滿5000減200元,滿1000元減50元,期待與您的合作!
[產品名稱]人促黃體激素(LH)ELISA檢測試劑盒
[英文名稱]Human luteotropic hormone,LH ELISA Kit
[貨號]ZK-H1117
[試劑盒]保存條件、保質期2-8℃低溫保存下,6個月的保質期。
[運輸方式]當地客戶可以由專門配送人員免費送貨上門貨快遞,外地客戶當天下單當天免費快遞送貨上門。
[技術服務]凡購買子科生物子科生物任何一款ELISA酶聯免疫分析檢測試劑盒,都可以享受免費代測服務,外地客戶可以由技術老師的指導下正確放置好樣本的保存方式后快遞郵寄到我公司技術部,本地客戶可以享受免費上門取樣服務!
人促黃體激素(LH)ELISA檢測試劑盒實驗測定具體步驟:
1.確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數目,并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數=樣品數+9;做雙份檢測時×2。其余重包裝好放如冰箱中。
2.將標準品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于血清、體液、 組織勻漿或細胞培養上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。
3.酶標板加上蓋,37℃反應 90 分鐘。
4.反應后用自動洗板機吸去酶標板內的液體;或甩去酶標板內液體,再對著吸水紙拍幾下。 不洗。
5.將準備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白顯色孔除 外)。37℃反應 60 分鐘。
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次,每次浸泡 1 分鐘左右。
7.將準備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白顯色孔除外)。37℃反應 30 分鐘。
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次,每次浸泡 1-2 分鐘左右。
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液,37℃避光反應 20-25 分鐘 (注意:顯色時間供參考,因用戶實驗室條件差異,顯色時間會有所不同。此時肉眼可 見標準品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍色,后 3-4 孔差別不明顯)。
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液,此時藍色立轉黃色。
11.用酶標儀在 450nm 測定 OD值。
有兩種設定空白對照的方案:
(1)將 TMB 空白顯色孔設為對照。所有的標準品和樣品的吸光值減去 TMB 空白顯色孔的 吸 光 值 后 , 在 坐 標 紙 上 畫 出 曲 線 , 以 吸 光 值 作 為 縱 坐 標 , 以 濃 度 作 為 橫 坐 標 。
(2)將零孔設為對照。所有的標準品和樣品的吸光值減去零孔的吸光值后,得到的數據可以 直接在坐標紙上畫出曲線。
樣品稀釋的一般原則
用戶須估計樣品待測因子的含量,決定適當的稀釋倍數,以使稀釋后樣品中待測因子的濃度 處于 ELISA 試劑盒的檢測范圍。根據待測因子含量高、中、低的不同,分別采取不同的稀釋方案:
高:指待測因子在 20-200ng/ml。一般按 1:100 稀釋。297μ ι 樣品稀釋液加 3μ ι 樣品。
中:指待測因子在 2-20ng/ml。一般按 1:10 稀釋。225μ ι 樣品稀釋液加 25μ ι 樣品。
低:指待測因子在 31.2→2000pg/ml。按 1:2 稀釋。100μ ι 樣品稀釋液加 100μ ι 樣品。
特低:指待測因子≤31.2pg/ml。樣品一般不做稀釋,按每孔 100μ ι 樣品直接加入。
以上方案僅供參考,樣品的稀釋應有詳細記錄。
注意:客戶收到我公司產品請*時間確認試劑盒是否有破損,酶標板是否封閉,使用前 TMB顯色液應為無色透明溶液,若發現顏色異常,或者其他問題請及時與我司售后人員進行,我們會*次安排進行退換。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,底物請避光保存。使用之后所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,以免造成污染!
用于標記ELISA試劑盒里抗體或抗抗體的酶須具有下列特性:
1、有高度的活性和敏感性;
2、在室溫下穩定;
3、反應產物易于顯現;
4、能商品化生產。
當前應用較多的有辣根過氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP應用zui廣。
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