人類白細胞抗原B27(HLA-B27)ELISA檢測試劑盒子科生物現貨供應,子科生物專業生產研發經營穩定、優質、高效、實用的ELISA試劑盒,本公司可以提供ELISA試劑盒免費代測,ELISA試劑盒批發價零售,是ELISA試劑盒專業生產廠家,并代理各大進口原裝品牌ELISA試劑盒,貨期短,*,原裝正品,!
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人類白細胞抗原B27(HLA-B27)ELISA檢測試劑盒?英文名稱:Human leucocyte antigen B27,HLA-B27 ELISA Kit
?產品規格:96T(人份)/48T(人份)(單孔檢測分別可以檢測90份樣本,42分樣本,一般都需要留6個孔做標準曲線)。
?檢測方法:酶聯免疫分析ELISA方法
?有效期: 4 個月(4℃);8 個月(-20℃)。
?保存方法: 2-8℃(頻繁使用時); -20℃(長時間不用時)。
?品牌:子科生物ZIKER,美國R&D,美國immonoway,美國sciencell,德國IBL
?質量保證:我告訴所有產品均需要經過質檢通過后,才允許出庫!
?適用范圍:實驗結果僅供科研參考,不推薦用于臨床診斷結果。
?ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等,子科生物ELISA產品主要用雙抗體夾心法。
凡購買我們公司的ELISA相關系列產品,都可以享受免費代測服務,只收取試劑盒的相關費用,實驗檢測和實驗涉及到的試劑全部都是免費提供,并可以提供zui終實驗數據分析工作。需要代測服務的客戶,您只需要準備收集好您的樣本,郵寄到我公司實驗室,本市的銷售人員可以上門取樣本,我公司收到樣本之后正常是在一周內給您檢測報告結果。
人類白細胞抗原B27(HLA-B27)ELISA檢測試劑盒操作步驟
實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。
基本原理
就是將抗原抗體固定到特定的載體上進行反應,并通過酶催化底物發生化學變化將抗原抗體反應通過顏色的形式顯現出來。
(1)將抗原抗體反應固相化:即試驗中的包被環節,使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團可以無選擇性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不破壞蛋白分子結構,保持其生物學特性和免疫學活性;
(2)封閉:固相吸附蛋白是非特異性的,在包被目的免疫蛋白后,未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力,為了保障抗原抗體反應的特異性,因此,包被剩余的固相表面應該用抗原抗體反應無關蛋白封閉。一般認為牛血清白蛋白是zui為理想的封閉劑,也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清替代。
(3)抗原抗體反應:抗原或抗體在適當的介質下可進行特異的抗原抗體反應。 (4)酶反應:酶可以通過共價鍵與抗原或抗體連接形成結合物,當抗原抗體反應的時候,被檢測靶目標中也結合了酶分子。
(5)ELISA試劑盒底物反應:結合在抗原抗體中的酶分子,可以促使底物發生顏色反應,檢測人員可以裸眼觀察,可以通過顏色來判定是否有免疫反應的存在,通過顏色的深淺判斷標本中相應抗原或抗體的含量,也可借用酶標儀在適當的波長讀取吸光度值。
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