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人一氧化氮(NO)ELISA檢測試劑盒?英文名稱:Human nitric oxide,NO ELISA Kit
?產品規(guī)格:96T(人份)/48T(人份)(單孔檢測分別可以檢測90份樣本,42分樣本,一般都需要留6個孔做標準曲線)。?檢測方法:酶聯免疫分析ELISA方法?有效期: 4 個月(4℃);8 個月(-20℃)。
?質量保證:我告訴所有產品均需要經過質檢通過后,才允許出庫!?適用范圍:實驗結果僅供科研參考,不推薦用于臨床診斷結果。?ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等,子科生物ELISA產品主要用雙抗體夾心法。
深圳子科生物自主研發(fā)酶聯免疫分析檢測試劑盒,品牌為ZIKER,可以檢測Human,Rat、Mouse、Porcine、Sheep、Monkey、Goat、Bovine、Canine、Rabbit、Chicken、Duck、Fish、Plant 等各種樣本,品種齊全,質量保證,免費代測、技術全程支持服務,我公司長期跟各大高校科研實驗室保持課題合作,經驗豐富,質量穩(wěn)定!我們所有的產品都是我司直接供貨,無中間差價,直接供貨,讓您以*惠的實驗預算完成您的實驗!
人一氧化氮(NO)ELISA檢測試劑盒操作步驟
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。
注意事項
☆試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存。實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
☆加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔之見的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響實驗的準確性以及重復性;一般加樣時間控制在10分鐘內,如果樣本數量過多,可使用多道移液器。
☆孵育:樣品要在密閉的容器內進行孵育,嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
☆洗滌:洗滌過程中反應孔中的殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,同時要消除板底殘留的液體和手指痕跡,避免影響zui后的酶標儀讀數。
☆反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,10分鐘左右),如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應。
☆建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應對樣品進行稀釋,計算結果時乘以相應的稀釋倍數。
☆建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經銷商,如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調換,但概不承擔產品本身以外的任何損失。
結果判斷
1、30分鐘內在波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值;
2、以OD值為縱坐標,以標準品的濃度為橫坐標,繪制曲線圖;
3、根據樣品的OD值查找對應的濃度范圍;
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