人血管內皮生長因子受體（VEGFR）ELISA檢測試劑盒

產品參數介紹：
●規格： 96T/48T
●反應時間： 1-5h
●保存方法： 2-8℃（頻繁使用時）; -20℃（長時間不用時）。 
●品牌：子科生物ZIKER
●有效期： 4 個月(4℃)；8 個月（-20℃）。 
●特點：靈敏性高、特異性強、重復性好
●服務：子科生物所有的elisa試劑盒均可免費代測，全程Elisa實驗技術指導。

預期應用
ELISA法定量測定相關血清、血漿或其它相關液體中的含量/活性。

人血管內皮生長因子受體（VEGFR）ELISA檢測試劑盒試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯板：一塊(96孔)/（48孔）
2. 標準品(凍干品)：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為10 ng/mL，做系列倍比稀釋后，分別稀釋成10 ng/mL，5 ng/mL ，2.5 ng/mL，1.25 ng/mL，0.62 ng/mL，0.31 ng/mL，0.15 ng/mL，其原液直接作為zui高標準濃度，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/mL，臨用前15分鐘內配制。
如配制5 ng/mL標準品：取0.5ml 10 ng/mL的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液：1&time20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A：1&time10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B：1&time10ml/瓶。
6. 檢測溶液A：1&time120ul/瓶(1：100)臨用前以檢測稀釋液A 1：100稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100ul)，實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如1ul檢測溶液A加99ul檢測稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。
7. 檢測溶液B：1&time120ul/瓶(1：100)臨用前以檢測稀釋液B1：100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液：1&time10ml/瓶。
9. 濃洗滌液：1&time30ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液：1&time10ml/瓶(2N H2SO4)。
標本的采集及保存
1．血清：標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
2．血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
操作步驟
各試劑在使用前平衡至室溫。
1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。除空白孔外，余孔分別加標準溶液或待測樣品100ul，注意不要有氣泡，輕輕混勻，酶標板加上蓋，37℃反應120分鐘。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。
3. 每孔加檢測溶液A工作液 100ul，37℃,60分鐘。洗板3次，350ul/每孔，甩干。
4. 每孔加檢測溶液B工作液 100ul，37℃，60分鐘，洗板5次，甩干。
5. 依序每孔加底物溶液90ul，37℃避光顯色30分鐘(此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯)。
6. 依序每孔加終止溶液50ul，終止反應(此時蘭色立轉黃色)。用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。

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