小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
標(biāo)本的采集及保存
1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)了夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
操作步驟
1、 取出試劑盒,于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進(jìn)行。
2、 取出酶標(biāo)板,按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。
3、空白微孔中加入50μl的樣品,空白對(duì)照加入50μl的蒸餾水;
4、 在樣品孔中加入10μl的生物素;(不含空白對(duì)照孔,切忌:生物素只加樣品孔!)
5、在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液;(不含空白對(duì)照孔)
6、將酶標(biāo)板用封口膠密封后,37℃孵育反應(yīng) 1小時(shí);(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7、 充分清洗酶標(biāo)板3-5次,保持各孔有充足的水壓;(濃縮洗滌液以1:100的比例與蒸餾水稀釋)
8、酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙*拍干;
9、各孔加入顯色劑A、B液各50μl;(不含空白對(duì)照孔)
10、各孔加入50μl終止液,終止反應(yīng);10、20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘;
結(jié)果判斷
1、30分鐘內(nèi)在波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值;
2、以O(shè)D值為縱坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo),繪制曲線(xiàn)圖;
3、根據(jù)樣品的OD值查找對(duì)應(yīng)的濃度范圍;
小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒ZK-R6180 兔膽囊收縮素A受體(CCKAR) ELISA Kit Rabbit Cholecystokinin A Receptor (CCKAR) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6181 兔半乳凝素3(GAL3) ELISA Kit Rabbit Galectin 3 (GAL3) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6182 兔白細(xì)胞激活黏附因子(ALCAM) ELISA Kit Rabbit Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule (ALCAM) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6183 兔肌肌酸激酶(CKM) ELISA Kit Rabbit Creatine Kinase, Muscle (CKM) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6184 兔補(bǔ)體因子B(CFB) ELISA Kit Rabbit Complement Factor B (CFB) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6185 兔血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE) ELISA Kit Rabbit Angiotensin I Converting Enzyme (ACE) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6186 兔胞外超氧化物歧化酶(SOD3) ELISA Kit Rabbit Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
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ZK-R6188 兔雙調(diào)蛋白(AREG) ELISA Kit Rabbit Amphiregulin (AREG) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6189 兔窖蛋白(CAV1) ELISA Kit Rabbit Caveolin 1 (CAV1) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6190 兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白(TGFβI) ELISA Kit Rabbit Transforming Growth Factor Beta Induced Protein (TGFbI) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6191 兔組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4) ELISA Kit Rabbit Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6192 兔白介素15(IL15) ELISA Kit Rabbit Interleukin 15 (IL15) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6193 兔白介素1受體拮抗劑(IL1RA) ELISA Kit Rabbit Interleukin 1 Receptor Antagonist (IL1RA) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6194 兔α2-HS糖蛋白(αHSG) ELISA Kit Rabbit Alpha-2-Heremans Schmid Glycoprotein (aHSG) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6195 兔泛素(Ub) ELISA Kit Rabbit Ubiquitin (Ub) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6196 兔親環(huán)素B(CYPB) ELISA Kit Rabbit Cyclophilin B (CYPB) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6197 兔緩激肽(BK) ELISA Kit Rabbit Bradykinin (BK) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6198 兔載脂蛋白C1(APOC1) ELISA Kit Rabbit Apolipoprotein C1 (APOC1) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6200 兔肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ) ELISA Kit Rabbit Heparin Cofactor II (HCII) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6201 兔半乳凝素4(GAL4) ELISA Kit Rabbit Galectin 4 (GAL4) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6202 兔結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF) ELISA Kit Rabbit Connective Tissue Growth Factor (CTGF) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-R6203 兔骨成型蛋白2(BMP2) ELISA Kit Rabbit Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物