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小鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒

時間:2017/3/20閱讀:305
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小鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格: 96T/48T
●反應(yīng)時間: 1-5h
●所需樣本體積: 50-100ul
●檢測波長: 450 nm
●用途: For research use only. Not for diagnostic use.
●特點:靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好
●服務(wù):子科生物所有的elisa試劑盒均可免費代測,全程Elisa實驗技術(shù)指導(dǎo)。
深圳子科生物ELISA試劑盒供應(yīng)商,擁有10年的研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗,擁有*的儀器設(shè)備,專業(yè)的技術(shù)人員和*的實驗技術(shù),目前已經(jīng)建立強大的實驗技術(shù)服務(wù)平臺,品牌設(shè)立為:ZIKER 。

小鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒操作步驟:各試劑在使用前平衡至室溫。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。除空白孔外,余孔分別加標準溶液或待測樣品100ul,注意不要有氣泡,輕輕混勻,酶標板加上蓋,37℃反應(yīng)120分鐘。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。
3. 每孔加檢測溶液A工作液 100ul,37℃,60分鐘。洗板3次,350ul/每孔,甩干。
4. 每孔加檢測溶液B工作液 100ul,37℃,60分鐘,洗板5次,甩干。
5. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光顯色30分鐘(此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯)。
6. 依序每孔加終止溶液50ul,終止反應(yīng)(此時蘭色立轉(zhuǎn)黃色)。用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
注意:1.每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2NH2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
      2.為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)。
洗板方法:
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
自動洗板:如果有自動洗板機,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
計算:以標準物的濃度為橫坐標(對數(shù)坐標),OD值為縱坐標(普通坐標),在半對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
注意事項:
1.洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
2.一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔。
4.如標本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。
5.在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。
6.底物請避光保存。

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