小鼠高敏甲狀腺素（u-T4）ELISA試劑盒標(biāo)本的采集及保存

1. 血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)了夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注：標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)
☆試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書(shū)要求保存。實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
☆加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔之見(jiàn)的時(shí)間間隔過(guò)大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性；一般加樣時(shí)間控制在10分鐘內(nèi)，如果樣本數(shù)量過(guò)多，可使用多道移液器。
☆孵育：樣品要在密閉的容器內(nèi)進(jìn)行孵育，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
☆洗滌：洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中的殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指痕跡，避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
☆反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，10分鐘左右)，如果顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
☆建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)?jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
☆建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個(gè)標(biāo)本)，如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn)，可和所購(gòu)經(jīng)銷(xiāo)商，如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。

小鼠高敏甲狀腺素（u-T4）ELISA試劑盒操作步驟
1、 取出試劑盒，于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進(jìn)行。
2、 取出酶標(biāo)板，按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。
3、空白微孔中加入50μl的樣品，空白對(duì)照加入50μl的蒸餾水；
4、 在樣品孔中加入10μl的生物素；(不含空白對(duì)照孔,切忌：生物素只加樣品孔！)
5、在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液；(不含空白對(duì)照孔)
6、將酶標(biāo)板用封口膠密封后，37℃孵育反應(yīng) 1小時(shí)；(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7、 充分清洗酶標(biāo)板3-5次，保持各孔有充足的水壓；(濃縮洗滌液以1：100的比例與蒸餾水稀釋)
8、酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙*拍干；
9、各孔加入顯色劑A、B液各50μl；(不含空白對(duì)照孔)
10、各孔加入50μl終止液，終止反應(yīng)；10、20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘；

結(jié)果判斷
1、30分鐘內(nèi)在波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值；
2、以O(shè)D值為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，繪制曲線圖；
3、根據(jù)樣品的OD值查找對(duì)應(yīng)的濃度范圍；

標(biāo)本要求： 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

小鼠高敏甲狀腺素（u-T4）ELISA試劑盒三糖鐵(TSI)瓊脂斜面    4ml×10 支/盒
葡萄糖半固體發(fā)酵管    2ml×10 支/盒
葡萄糖銨瓊脂培養(yǎng)基斜面    1.5ml×10 支/盒
尿素瓊脂斜面（pH7.2）    4ml×10 支/盒
西蒙氏檸檬酸鹽瓊脂斜面    4ml×10 支/盒
西蒙氏檸檬酸鹽瓊脂斜面    1.5ml×10 支/盒
青化鉀（KCN）培養(yǎng)基    1ml×10 支/盒
青化鉀（KCN）對(duì)照培養(yǎng)基    1ml×10 支/盒
七葉苷發(fā)酵管    1ml×10 支/盒
5%乳糖發(fā)酵管    1ml×10 支/盒
甘露醇發(fā)酵管    1ml×10 支/盒
鳥(niǎo)氨酸脫羧酶試驗(yàn)    1ml×10 支/盒
賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)    1ml×10 支/盒
氨基酸脫羧酶試驗(yàn)對(duì)照    1ml×10 支/盒
無(wú)菌液體石蠟    2ml×10 支/盒
水楊苷發(fā)酵管    1ml×10 支/盒
棉子糖發(fā)酵管    1ml×10 支/盒
甘油發(fā)酵管    1ml×10 支/盒
蛋白胨水    1ml×10 支/盒
志賀氏菌套裝生化鑒定管 14 種（GB 4789）    17 支/套×10 套