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小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒

時間:2017/3/16閱讀:256
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小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒標本的采集及保存

1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過了夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.細胞培養物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響zui后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
實驗操作注意事項
☆試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存。實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
☆加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔之見的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響實驗的準確性以及重復性;一般加樣時間控制在10分鐘內,如果樣本數量過多,可使用多道移液器。
☆孵育:樣品要在密閉的容器內進行孵育,嚴格按照說明書上規定的孵育時間和溫度進行。
☆洗滌:洗滌過程中反應孔中的殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,同時要消除板底殘留的液體和手指痕跡,避免影響zui后的酶標儀讀數。
☆反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,10分鐘左右),如果顏色較深,請提前加入終止液終止反應。
☆建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應對樣品進行稀釋,計算結果時乘以相應的稀釋倍數。
☆建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經銷商,如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調換,但概不承擔產品本身以外的任何損失。

小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒操作步驟
1、 取出試劑盒,于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實驗過程應在室溫(20-25℃)內進行。
2、 取出酶標板,按照標準品的次序分別加入50μl的標準品溶液于空白微孔中。
3、空白微孔中加入50μl的樣品,空白對照加入50μl的蒸餾水;
4、 在樣品孔中加入10μl的生物素;(不含空白對照孔,切忌:生物素只加樣品孔!)
5、在各孔中加入100μl的酶標記溶液;(不含空白對照孔)
6、將酶標板用封口膠密封后,37℃孵育反應 1小時;(在孵育箱中保持穩定的溫度與濕度)
7、 充分清洗酶標板3-5次,保持各孔有充足的水壓;(濃縮洗滌液以1:100的比例與蒸餾水稀釋)
8、酶標板洗滌后用吸水紙*拍干;
9、各孔加入顯色劑A、B液各50μl;(不含空白對照孔)
10、各孔加入50μl終止液,終止反應;10、20-25℃下避光反應15分鐘;

結果判斷
1、30分鐘內在波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值;
2、以OD值為縱坐標,以標準品的濃度為橫坐標,繪制曲線圖;
3、根據樣品的OD值查找對應的濃度范圍;

標本要求: 
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒三糖鐵(TSI)瓊脂斜面    4ml×10 支/盒
葡萄糖半固體發酵管    2ml×10 支/盒
葡萄糖銨瓊脂培養基斜面    1.5ml×10 支/盒
尿素瓊脂斜面(pH7.2)    4ml×10 支/盒
西蒙氏檸檬酸鹽瓊脂斜面    4ml×10 支/盒
西蒙氏檸檬酸鹽瓊脂斜面    1.5ml×10 支/盒
青化鉀(KCN)培養基    1ml×10 支/盒
青化鉀(KCN)對照培養基    1ml×10 支/盒
七葉苷發酵管    1ml×10 支/盒
5%乳糖發酵管    1ml×10 支/盒
甘露醇發酵管    1ml×10 支/盒
鳥氨酸脫羧酶試驗    1ml×10 支/盒
賴氨酸脫羧酶試驗    1ml×10 支/盒
氨基酸脫羧酶試驗對照    1ml×10 支/盒
無菌液體石蠟    2ml×10 支/盒
水楊苷發酵管    1ml×10 支/盒
棉子糖發酵管    1ml×10 支/盒
甘油發酵管    1ml×10 支/盒
蛋白胨水    1ml×10 支/盒
志賀氏菌套裝生化鑒定管 14 種(GB 4789)    17 支/套×10 套

 

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