小鼠雌激素受體β(ERβ)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生里鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠雌激素受體β(ERβ)ELISA試劑盒
自備物品:1.酶標(biāo)儀(450nm)2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒溫箱;
操作注意事項(xiàng)
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為0的S0號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍,zui終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑的準(zhǔn)備: 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法:
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
小鼠雌激素受體β(ERβ)ELISA試劑盒操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
試劑盒性能:
1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6個月
小鼠雌激素受體β(ERβ)ELISA試劑盒
改良 EC 肉湯(mEC+n)基礎(chǔ)変法 EC ブイヨンModified EC Broth ZIKERse 250g/瓶
山梨醇麥康凱瓊脂(CT-SMAC 瓊脂基礎(chǔ))CT-SMAC 寒天基礎(chǔ)Sorbitol MacConkey Agar (CT-SMAC Agar ZIKERse) 250g/瓶
麥康凱肉湯基礎(chǔ)(CT-MAC 肉湯基礎(chǔ))CT-MAC ブイヨン基礎(chǔ)CT-MAC Broth ZIKERse 250g/瓶
月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯-MUG (LST-MUG)LST-MUG ブイヨンLauryl Sulfate Tryptose Broth-MUG 1000ml/瓶
山梨醇麥康凱半固體培養(yǎng)基ソルビトールマッコンキー固體培地Sorbitol MacConkey Semi-solid Medium 250g/瓶
改良胰蛋白胨大豆肉湯(mTSB)基礎(chǔ)変法トリプトソーャブイヨン基礎(chǔ)mTSB Broth with Novobiocin ZIKERse 250g/瓶
四硫磺酸鈉煌綠(TTB)增菌液基礎(chǔ)TTB 増菌ブイヨン基礎(chǔ)Tetrathionate Broth ZIKERse 250g/瓶
亞西酸鹽胱氨酸(SC)增菌液セレナイト?シスチンブイヨンSelenite Cystine Broth 250g/瓶
亞硫酸鉍(BS)瓊脂亜硫酸ビスマス寒天Bismuth Sulfite Agar 250g/瓶
HE 瓊脂HE 寒天Hektoen Enteric Agar 250g/瓶
木糖賴氨酸脫氧膽鹽(XLD)瓊脂XLD 寒天Xylose Lysine Desoxycholate Agar 250g/瓶
膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL)DHL 培地Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose Medium 250g/瓶
氯化鎂孔雀綠增菌液(MM)ラパポート?バシリアディス培地Rappaport-Vassiliadis Medium 250g/瓶
亞利桑那菌瓊脂(SA)サルモネラ?アリゾナ寒天Salmonella Arizona Agar 250g/瓶
WS 瓊脂WS 寒天WS Agar 250g/瓶
RVS 肉湯RVS ブイヨンRappaport Vassiliadis Salmonella Enrichment Broth 250g/瓶
亮綠酚紅瓊脂ブリリアントグリーン寒天Brilliant Green/Phenol Red Lactose Agar 250g/瓶