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小鼠三肽基肽酶Ⅰ(TPP1)ELISA試劑盒

時(shí)間:2017/3/14閱讀:336
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小鼠三肽基肽酶Ⅰ(TPP1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。

小鼠三肽基肽酶Ⅰ(TPP1)ELISA試劑盒操作步驟:
1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。
4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5. 每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。
8. 取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。
 
結(jié)果判斷與分析:
1、 儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、 以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的LTB4標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的LTB4含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

小鼠三肽基肽酶Ⅰ(TPP1)ELISA試劑盒MUGal 肉湯基礎(chǔ)MUGal ブイヨン基礎(chǔ)MUGal Broth ZIKERse    2000ml/瓶
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哥倫比亞-MUG 瓊脂培養(yǎng)基コロンビア-MUG 寒天培地Columbia-MUG Agar Medium    1000ml/瓶
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緩沖 MUG 瓊脂緩衝 MUG 寒天Buffered MUG Agar    2000ml/瓶
乳糖肉湯乳糖ブイヨンFluid Lactose Medium    250g/瓶
乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂LMG 寒天LMG Agar    250g/瓶
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乳糖蛋白胨培養(yǎng)液乳糖ペプトン培養(yǎng)液Lactose Peptone Broth    250g/瓶
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Honda 氏產(chǎn)毒肉湯基礎(chǔ)Honda 氏病毒産生ブイヨン基礎(chǔ)Honda Toxin-Producing Broth    250g/瓶
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