小鼠三肽基肽酶Ⅰ(TPP1)ELISA試劑盒實驗原理:
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素,經過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
小鼠三肽基肽酶Ⅰ(TPP1)ELISA試劑盒操作步驟:
1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。
4. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5. 每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。
8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。
結果判斷與分析:
1、 儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、 以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的LTB4標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的LTB4含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
小鼠三肽基肽酶Ⅰ(TPP1)ELISA試劑盒MUGal 肉湯基礎MUGal ブイヨン基礎MUGal Broth ZIKERse 2000ml/瓶
Aliz-gal 瓊脂Aliz-gal 寒天Aliz-gal Agar 1000ml/瓶
中國藍瓊脂チャイナブルー寒天China Blue Agar 250g/瓶
哥倫比亞-MUG 瓊脂培養基コロンビア-MUG 寒天培地Columbia-MUG Agar Medium 1000ml/瓶
4-甲基傘形酮葡糖苷酸(MUG)培養基MUG 培地MUG Medium 2000ml/瓶
緩沖 MUG 瓊脂緩衝 MUG 寒天Buffered MUG Agar 2000ml/瓶
乳糖肉湯乳糖ブイヨンFluid Lactose Medium 250g/瓶
乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂LMG 寒天LMG Agar 250g/瓶
胰化大豆硫酸鎂瓊脂(TSAM)TSAM 寒天TSAM Agar 250g/瓶
胰蛋白胨膽汁瓊脂(TZIKER)トリプトン膽汁寒天培地Tryptone Bile Agar 250g/瓶
乳糖發酵培養基乳糖ブイヨンLactose Broth 250g/瓶
乳糖蛋白胨培養液乳糖ペプトン培養液Lactose Peptone Broth 250g/瓶
亮綠乳糖膽鹽培養液BGLB 培養液Brilliant Green Lactose Bile Broth 250g/瓶
VRB-MUG 瓊脂VRB-MUG 寒天VRB-MUG Agar 100g/瓶
Honda 氏產毒肉湯基礎Honda 氏病毒産生ブイヨン基礎Honda Toxin-Producing Broth 250g/瓶
Elek 氏培養基エレック培地Elek Medium 250g/瓶
Tergitol-7 瓊脂Tergitol-7 寒天Tergitol-7 Agar 250g/瓶
LES-Endo 瓊脂LES-Endo 寒天LES Endo Agar 250g/瓶