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上海永葉生物科技有限公司

藥敏的分類與特點

時間:2014-2-21閱讀:496
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各國細胞庫支原體污染的統(tǒng)計表

國家   受支原體污染(%)  報告年度

USA-FDA  15  1993(past 30 years)

USA-ATCC  15-20  1992

Japan-(IFO,RIKEN,JCR 80~30~22  1981 1987-19931998

Germany-DSM  36  1990-1994

Argentina  65  1987

Israel  32  1986-1993

China  95   1990

 

造成支原體高污染率的原因為

1.支原體size 0.1~0.8 um,無細胞壁,可透過一般過濾膜(0.22-0.45 um)

2.支原體污染時,沒有明顯的肉眼或一般光學(xué)顯微鏡可觀察到的特征變化

3.過去缺乏簡單、快速且可靠的檢測方式

4.細胞流通間缺乏品管,造成實驗室間的相互污染

5.研究或操作人員忽略污染問題

 

支原體污染了來源: 

1.  已受污染的細胞

2.  操作人員的疏失

3.  已受污染的培養(yǎng)基、血清

4.  操作環(huán)境不良、實驗器具不潔等

由于支原體為人體口腔中之正常菌叢,實驗室之操作人員的污染亦可能為污染源,須十分注意。而萬一細胞已受支原體污染時,*的處理原則為將細胞高壓滅菌后丟棄,以免污染其它潔凈的細胞株。但是若是堅持要作去除支原體污染,有以下幾種方法,只不過結(jié)果會與原始的細胞特性有差異。

 

去除支原體污染:

1. 抗生素處理:BM-cyclin(Roche),MRA(mycoplasma removal agent,ICN),Ciprofloxcin(Bayer),Enrofloxacin(Bayer)

2. Nucleic acid metabolites:5-bromouracil,Hoechst 33258,bromodeoxyuridine

3. Anti-sera

 

預(yù)防與控制方面可從以下各點加強注意:

 設(shè)備方面:

1.  使用已作支原體測試ok之細胞株

2.  于另一隔離之區(qū)域操作未知是否有支原體污染之細胞

3.  使用不添加抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞

 檢測方面:定期以標(biāo)準(zhǔn)的支原體檢測方法檢測細胞、培養(yǎng)基、血清、ddH2O有否被支原體污染。

 實驗操作人員之無菌觀念與無菌操作技術(shù)之要求

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