細胞培養中細胞生長緩慢-問題分析
就一個實驗室來說,無論它運作多么好,總會因為招募新人、革新技術或拓展方向而影響原來的流程,從而產生各種各樣的新問題。解決這些問題的一個方法就是確保原先操作規程不發生任何變化,即規范標準操作程序(SOPs),且不經嚴格*地考證后不輕易改變SOPs。然而,這樣做往往非常困難,特別是針對科學研究。科學本身的生命力就在于不斷變革研究內容,拓展研究領域,更新研究方法。
當細胞生長緩慢時,先確定實驗室中只有你個人培養體系有這種問題,還是其他研究人員也遇到同樣的問題?
如果此問題只發生在你的培養基體系,檢查你所培養的細胞是否存在污染。檢查你用于培養細胞的培養基和血清(如是否批次不同或廠商不同)。如果你平常使用的是粉劑或10*儲存液,而現在購買的培養基更換為1*液體,而隨后證明問題就出現在此,處理方法參見關于培養基的部分。
如果問題與培養基無關,那么很可能還是細胞的問題。
如果問題出在你所培養細胞的本身,復蘇另一支凍存的細胞,并且與正在培養的細胞加以比較。兩種細胞的培養應分開,以免在培養之初就產生污染。隨后做如下檢查:細胞保藏制度-計數傳代培養的細胞,并繪制生長曲線,與以前培養該細胞的資料進行比較,檢查是否有下列因素:傳代時是否接種密度過低;細胞傳代是否過于頻繁;傳代平臺期是否過長。
(來源: 英 弗雷謝尼 《動物細胞培養基本技術指南》 細胞生長緩慢 拜力生物編輯整理)