肝星狀細胞提取實驗指南
星狀細胞位于Disse間隙內,具有貯藏、代謝itA、合成細胞外基質（ECM）的功能;肝星狀細胞的激活是肝纖維化形成的中心環節。
建立了經濟、穩定的大鼠肝星狀細胞提取和培養方法;傳代培養可獲得較為穩定的細胞系。肝星狀細胞提取實驗步驟如下：
1、大鼠門靜脈置管，D-Hanks+肝素液灌注，*驅走肝內血液，至灰黃色。
2、0.5g/L的膠原酶（Hanks）離體灌注，5ml/min, 5min。
3、0.25g/L的膠原酶（Hanks）+消0.05g/L的DNA-1酶（Hanks）消化，10min。
4、中止消化后200目過濾，重懸。
5、50g離心去沉淀、取上清。
6、上清500g離心取沉淀。
7、0.05g/L的DNA-1酶（Hanks）重懸，500g再次梯度離心，取沉淀。
8、15%Optipepe重懸為10ml，上加10%Optipepe 10ml，上覆hanks液5ml（加時注意不要讓界面混勻）
9、1400g離心17min，取白色細胞帶。
10、爬片，固定，鑒定。
來源：《改良的大鼠肝星狀細胞分離方法》拜力生物編輯整理
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