拜力生物編輯整理：

血清，以牛血清同馬血清為zui常用。血清內(nèi)含有多種促細(xì)胞生長因子，促貼壁因子及其它活性物質(zhì)等。一般需加10%-20%。

附著底物：

1、玻璃

2、一次性聚氯乙烯材料

3、飼細(xì)胞(Feeder cell)用成纖維細(xì)胞或其他細(xì)胞長成單層后，再用大劑量射線照射，使細(xì)胞失去增殖能力但尚存活同有代謝功能。將特別難培養(yǎng)地細(xì)胞接種于其上。

體外培養(yǎng)細(xì)胞成功率分析

成功地關(guān)鍵:培養(yǎng)物必須貼附在底物上

細(xì)胞生長同增殖

1、培養(yǎng)條件

2、組織同細(xì)胞地供體年齡

3、貼附底物

4、培養(yǎng)方法：酶消化分離

組織培養(yǎng)設(shè)施同基本條件

實驗室設(shè)計：細(xì)胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術(shù)，要求工作環(huán)境同條件必須保證無微生物污染同不受其它有害因素地影響。細(xì)胞培養(yǎng)室同設(shè)計原則是防止微生物污染同有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥同無煙塵。細(xì)胞培養(yǎng)室地設(shè)計原則一般是無菌。操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動地內(nèi)側(cè)，常規(guī)操作同封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。常用設(shè)施及設(shè)備

1、超凈工作臺；

2、洗刷消毒間：烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。

3、無菌操作間：一般由更衣間、緩沖間同操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒好地?zé)o菌物品等。

4、分析間：顯微鏡、計算機及打印機等。

5、操作間：普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物

培養(yǎng)器皿

常用地器皿有下面幾種。

1、液體儲存瓶：用于儲存各種配制好地培養(yǎng)液、血清等液體，常用規(guī)格有500ml、250ml、100ml。

2、培養(yǎng)瓶：根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞種類要求不同培養(yǎng)瓶地形態(tài)各異，規(guī)格有200ml、100ml、50ml、25ml、10ml 等幾種

3、培養(yǎng)皿：用于開放式培養(yǎng)及其它用途。分直徑30mm、60mm、120mm

4、培養(yǎng)板

培養(yǎng)用液：(Balanced Salt Solution,BSS)、天然培養(yǎng)基(Natural Medium)、合成培養(yǎng)基(Synthetic Medium)Hanks’、 (Hanks’ Balanced Salt Solutions，HBSS)

成分 含量(g/L)

CaCl2 (無水氯化鈣) 0.14

KCl 0.40

KH2PO4 0.06

MgCl2?6H2O 0.10

MgSO4?7H2O 0.10

NaCl 8.00

NaCO3 0.35

Na2HPO4 0.048

D-Glucose 1.00

Phenol Red 0.01

鈣鎂有促使細(xì)胞凝結(jié)作用,配制離散細(xì)胞用地消化液同細(xì)胞洗滌液時,宜采用D-Hanks

天然培養(yǎng)基

血清 細(xì)胞培養(yǎng)液中添加地血清有牛血清、馬血清、人血清等，其中牛血清是zui常用地血清，分為胎牛血清同新生小牛血清

熱滅活是指56℃, 30 分鐘加熱已*解凍地血清。加暖過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理地目地是使血清中地補體成分(complement)滅活。除非必須，一般不建議作此熱處理，因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多，而且還會影響血清地質(zhì)量 。

相關(guān)產(chǎn)品： 胎牛血清，細(xì)胞因子，實驗室耗材 細(xì)胞株 QIAGEN試劑盒