淋巴細(xì)胞分離液1.077

商品屬性：

商品介紹：

淋巴細(xì)胞分離液（Lymphocyte Separation Medium，簡(jiǎn)稱(chēng)LSM）是一種無(wú)菌的即用型分離液，基于B?yum的Ficoll-甲泛影鈉溶液做過(guò)一些改良，使得操作簡(jiǎn)單快速且分離效率更高。每100 ml淋巴細(xì)胞分離液中含有6.2 g 聚蔗糖（Ficoll）和9.4 g 泛影鈉，20℃下的密度為1.0770-1.0800 g/ml。不僅適用于外周血淋巴細(xì)胞，也可分離其他組織來(lái)源的淋巴細(xì)胞，包括臍帶血和骨髓細(xì)胞。

工作原理

去纖維蛋白或肝素化人血以1：1的比例用生理鹽水稀釋?zhuān)釉诜蛛x液上層，之后低速離心30 min。在離心過(guò)程中，差速遷移使其終形成幾個(gè)細(xì)胞分層。聚集在管底的顆粒主要是紅細(xì)胞和多形核粒細(xì)胞，通過(guò)梯度遷移至管底。根據(jù)其密度的大小，淋巴細(xì)胞和其他單個(gè)核細(xì)胞如單核細(xì)胞，以及血小板分布在血漿和LSM兩層之間。淋巴細(xì)胞可以通過(guò)吸取分界層溶液回收，并通過(guò)進(jìn)一步清洗來(lái)去除血小板，LSM和血漿。

步驟和注意事項(xiàng)：?

準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)環(huán)境：?確保實(shí)驗(yàn)區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計(jì)數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細(xì)胞培養(yǎng)：?

準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細(xì)胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細(xì)胞。?

取出保存于低溫下的細(xì)胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細(xì)胞凍存與復(fù)蘇：?

細(xì)胞系的凍存是將生長(zhǎng)較好的傳代細(xì)胞懸浮在加有冷凍保護(hù)劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對(duì)其長(zhǎng)期保存的過(guò)程。?

復(fù)蘇則是將凍存的細(xì)胞系恢復(fù)到常溫的過(guò)程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細(xì)胞活力。?

細(xì)胞計(jì)數(shù)：?

制備細(xì)胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細(xì)胞或收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，?制成單個(gè)細(xì)胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格中的細(xì)胞數(shù)，?細(xì)胞壓中線時(shí)，?只計(jì)左側(cè)和上方者，?不計(jì)右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色，?并觀察細(xì)胞所發(fā)出的熒光信號(hào)，?以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應(yīng)（?PCR）?：?

準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?

在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液，?開(kāi)始PCR反應(yīng)。?

PCR反應(yīng)的成功與否，?可以通過(guò)電泳、?測(cè)序等方法進(jìn)一步確認(rèn)。?

轉(zhuǎn)染：?

準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細(xì)胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細(xì)胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細(xì)胞，?并進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。?

在操作過(guò)程中，?應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時(shí)登記購(gòu)買(mǎi)耗材或試劑，?保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：