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022225結晶紫中性紅膽鹽MUG瓊脂(VRBA-MUG)(VioletRedBileAgar-MUG)用途:結晶紫中性紅膽鹽MUG瓊脂用于食品中大腸桿菌的平板計數
022225 結晶紫中性紅膽鹽MUG瓊脂(VRBA-MUG)
(Violet Red Bile Agar-MUG)
用 途:
結晶紫中性紅膽鹽MUG瓊脂用于食品中大腸桿菌的平板計數。(GB/T 4789.38-2008)
原 理:
蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;乳糖是可發酵的糖類;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;3號膽鹽和結晶紫抑制革蘭氏陽性菌,特別抑制革蘭氏陽性桿菌和糞鏈球菌;中性紅為pH指示劑;瓊脂為凝固劑;大腸埃希氏桿菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基傘形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide簡稱MUG)的β糖醛酸苷鍵,使其水解,釋放的4-甲基傘形酮在366nm紫外燈下產生藍白色熒光。97%的大腸埃希氏桿菌、10%的沙門氏菌以及少量的志賀氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。
培養基配方(每升):
蛋白胨 7.0g
酵母膏粉 3.0g
乳糖 10.0g
氯化鈉 5.0g
3號膽鹽 1.5g
中性紅 0.03g
結晶紫 0.002g
瓊脂 15.0g
MUG 0.1g
最終pH 7.4±0.2
使用方法:
1、稱取結晶紫中性紅膽鹽MUG瓊脂41.6g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝三角瓶,無需高壓滅菌,備用。
2、以無菌手續取樣品25g或25mL,加入含225mL無菌磷酸鹽緩沖液(或生理鹽水)的三角瓶內,充分振搖或用均質器均質1min成1:10稀釋液,然后以1:10繼續稀釋,選擇2~3個適宜的連續稀釋度,每個稀釋度接種兩個平皿,傾注加熱溶解并冷至45℃左右的培養基,瓊脂凝固后再加3-4mL培養基覆蓋平板表層。
3、36±1℃培養18—24h。
4、觀察菌落形態,并于暗室中用360nm~360nm波長紫外燈照射,計數平板上發淺藍色熒光的菌落。
質量控制:
質控菌株接種后于36±1℃培養18—24h結果如下:
貯 存:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期二年。
規 格:100g
參考文獻:
1. GB/T 4789.38-2008 中華人民共和國國家標準 食品安全國家標準 食品衛生微生物檢驗 大腸桿菌計數
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