當前位置:上海子實生物科技有限公司>>技術文章>>誘發實驗動物肝癌的幾種方法
造模原理:利用外源性化學致癌因素引起細胞遺傳特性異常,呈現出異常生長和高增值活性,形成癌癥。常用的致癌物質有:DEN(乙亞硝基胺)、DBA(4-二甲基氨基偶氮苯、2AAF(2-乙酰氨基酸)、OAAT(亞胺基偶氮甲苯)和huang曲霉素等。
1、DEN誘導:取體重250g左右的封閉群大鼠,雌雄不限,喂養普通飼料,隨意飲水,給與0.25%的DEN水溶液0.25~1mL灌胃或稀釋10倍放在飲水瓶中自由飲水,劑量為每天2~10ml/kg喂養半年以上。
2、OAAT誘發小鼠肝癌:用1% OAAT溶液涂在小鼠的兩肩胛間皮膚上,隔日一次,每次2~3滴,一般涂100次,連續7~8周即可。
3、DBA誘發大鼠肝癌:用含0.06% DBA的飼料喂養大鼠,飼料中DBA不應超過1.5~2mg/kg,連續喂養4~6個月。
4、huang曲霉素誘發大鼠肝癌:用0.001~0.015 ppm huang曲霉素的飼料喂6個月。
總結: DEN誘發大鼠致癌率為70%,DBA為60%,OAAT涂抹法7~8周即可出現*個腫瘤。huang曲霉素誘發大鼠肝癌發生率為80%。上述方法從病因學角度分析,與人體腫瘤較為近似,可用于腫瘤特點的深入研究。
整體課題外包和整體實驗服務
1、動物模型:糖尿病模型、帕金森動物模型、腦中風動物模型、脊髓損傷動物模型、肝損傷動物模型、裸鼠成瘤模型、腹腔注射、灌胃、尾靜脈注射等。
2、細胞功能檢測:慢病毒、腺病毒、合成試劑或RNAi類產生的基因過表達或基因沉默、細胞遷移和侵襲檢測、細胞凋亡檢測(tunel和流式檢測)、細胞周期檢測(流式方法、Brdu)、細胞克隆形成、淋巴細胞分離、原代細胞分離培養、耐藥細胞株建立、穩轉株的構建等。
3、分子生物學實驗:RT-PCR、QPCR、載體構建、基因芯片等
4、蛋白檢測:免疫組化、westerblot、ELISA、蛋白芯片等。
5、病理檢測:HE染色、病理分析等。
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