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非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1

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所  在  地上海市

更新時間:2021-04-02 11:24:11瀏覽次數(shù):766次

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非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1相關(guān)產(chǎn)品:氧化鎂1309-48-4
557-04-0
2,9-二甲基-1,10-菲羅啉484-11-7
50-63-5

公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨號

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1

貼壁生長

EY-X63659

細(xì)胞名稱  非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1
形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞

生長特性: 貼壁生長

特征特性: Vero-HCV-E1細(xì)胞整合有丙型肝炎病毒的E1基因,能穩(wěn)定表達(dá)E1蛋白,是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國家重點實驗室于2008年構(gòu)建并保存。

培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況: C23

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 陰性
?
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
11-Hydroxycodaphniphylline

CAS No.:1186496-68-3

中文名:

分子式:C30H47NO4

2金剛 訂購|咨詢  前動力蛋白2(PK2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

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阿多弗林 訂購|咨詢  前動力蛋白受體1(PKR1) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

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3,4,5三酰奎寧 訂購|咨詢  前列腺素D2(PGD2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

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槲皮素7O葡萄糖苷 訂購|咨詢  前列腺素E2(PGE2) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg

CKAP4  細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白4抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Hydrocortisone

CRISP3  富含半胱分泌蛋白3抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ibutilide fumarate

CKMT/Creatine kinase MT  性型線粒體肌激酶抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ibutilide fumarate

SCRO/DCUN1D1  鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)蛋白抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Isepamicine Sulphate

DDX53/CT26  腫瘤/抗原26抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Bexarotene

DEPDC1  細(xì)胞周期調(diào)控蛋白SDP35抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Bexarotene

ENTPD5/CD39L4  原癌基因CD39樣蛋白4抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ketoprofen

EST1A  端粒酶結(jié)合蛋白EST1A抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ketoprofen

馬來那敏  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Chlorpheniraminemaleate  含量:USP級,4400u/mg

馬來二丁酯  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:DBM  含量:CP

馬來二甲酯  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Dimethylmaleate  含量:BR,95%

馬來  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Maleicacid  含量:USP級,50萬u/g

馬來羅格列  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Rosiglitazonemaleate  含量:BR

馬來  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Maleicacidsodiumsalt  含量:BR,97%

馬栗樹皮苷  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Esculinsesquihydrate  含量:AR,98%

馬鈴薯淀粉  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Starchfrompotato  含量:超純,99%

馬鈴薯浸出粉  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Potatoextract  含量:超純,98%

馬尿L  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:HippurylLphenylalanine  含量:BR,98%
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1玫瑰紅鈉瓊脂規(guī)格:BR250g詳情介紹

改良纖維二糖--瓊脂基礎(chǔ)(MCPC)規(guī)格:纖維二糖詳情介紹

艾格瓊脂規(guī)格:250g用途:用于過程中無菌監(jiān)測

性蛋白胨水顆粒規(guī)格:250g用途:用于霍亂弧菌選擇性增菌培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))

品紅亞硫鈉瓊脂平板(9cm)規(guī)格:10個/包用途:用于飲用水、水源水中總大腸菌群的選擇性分離和確證

瓊脂培養(yǎng)基N(化十六基三瓊脂)規(guī)格:250g用途:用于綠膿假單胞菌的分離培養(yǎng)
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

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