非洲綠猴SV40轉化的腎細胞(C0S-7)
細胞介紹
此細胞株源自CV-1細胞株,經帶有編碼野生型T抗原的起始失活突變的SV40轉染得到。
細胞特性
1)來源:非洲綠猴腎
2)形態:成纖維細胞,貼壁生長
3)含量:>lxl06 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
細胞接受后的處理:
1.收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。
2.請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37°C培養約2-3h〇
3.棄去T25瓶中的培養基,添加6ml本公司附帶的*培養基。
4.如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的*培養基。
5.接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得。
非洲綠猴SV40轉化的腎細胞(C0S-7)
細胞用途:僅供科研使用。
本公司的細胞培養操作規程,供參考
1)培養基及培養凍存條件準備:
1.準備 DMEM 培養基(DMEM,GIBCO,貨號 11965-092),90%;胎牛血清,10%。
2. 培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37°C,培養箱濕度為 70%-80%。
3.凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
2)細胞處理:
復蘇細胞:將含有lmL細胞懸液的凍存管迅速放入37°C水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入lmL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
非洲綠猴SV40轉化的腎細胞(C0S-7)
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養瓶中,置于37°C培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入lmL培養液后吹勻。移入到事先準備好的含有5ml基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,先要消化處理并進行細胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行,zui后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數后離心,用血清重懸浮,加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每lml的數量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
注意事項:
收到細胞后,若發現干冰己揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。?