人組織細胞淋巴瘤細胞(U937)
細胞介紹
該細胞是由Nilsson K實驗室于1974年從一名37歲的患有惡性組織細胞性淋巴瘤的白人男性的胸水中分離建立的。1979年來的研究顯示該細胞在人混合淋巴細胞培養物上清、佛波酯、VitD3、\z-IFN、TNF和*的誘導下可以向終末單核細胞分化。該細胞不合成免疫球蛋白,EBV陰性;可產生*、(3-2-微球蛋白,受PMA刺激后可產生TNF-ct;表達C3R;可作轉染宿主;表達Fas,對TNF和抗Fas的抗體敏感。
細胞特性
1)來源:淋巴瘤
2)形態:單核細胞,懸浮生長
3)含量:>lxl06 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
運輸和保存:
使用T25瓶充液發送活細胞。收到細胞后,請先在顯微鏡下檢查細胞生長狀態,并將T25瓶置于培養箱約6h或過夜后,再次檢查細胞狀態。若狀態良好,可按照以下細胞培養步驟進行細胞后續處理操作。若發現可疑污染物,請及時與我們取得。
人組織細胞淋巴瘤細胞(U937)
細胞用途:僅供科研使用。
細胞培養步驟
1)培養基及培養凍存條件準備:
1.準備 RPIVM-1640 培養基(RPIVM-1640:GIBCO,貨號 31800022,添加 NaHC031.5g八,
D-葡萄糖2.5g八,丙酮酸鈉O.llg八),90%;優質胎牛血清,10%。
2.培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3.凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
2)細胞處理:
復蘇細胞:將含有lmL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入l〇cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
人組織細胞淋巴瘤細胞(U937)
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
注意事項:
收到細胞后,若發現干冰己揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。