ELISA試劑盒作為一種固相免疫測定，抗原抗體的結合反響在固相上進行，要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結合，必須在必定的溫度條件下反響一定的時刻。溫育所需時刻與溫度成反比，即溫度越高，則所需時刻相對較短。zui為常用的溫育溫度有37℃和室溫，其次是43℃和2～8℃。一些操作者，擅自改變說明書操作，ELISA試劑盒檢測成果牢靠的必要條件。ELISA試劑盒的操作因固相載體的構成不同而有所差異，國內醫學查驗一般均用板式點。

ELISA試劑盒需要將微孔板中培育的細胞進行固定和通透化，然后再用抗體原位檢測。ELISA試劑盒POT有點像蛋白印跡Western blot，先在帶膜的微孔板中培育細胞，然后在膜上檢測細胞排泄的抗原構成斑駁。此外，我們還需要根據本身需要挑選96孔板或是384孔板進行ELISA試劑盒試驗。

ELISA試劑盒試驗，雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體和檢測抗體之間，這種辦法既活絡又有用，受到了許多研究者的喜愛。不過有時分雙抗夾心法并不是挑選，例如有時分抗原特別小讓兩個大抗體難以附著，又或者抗體只要一個抗體結合位點。
?

國外試劑均與特別儀器合作應用，兩者均有具體的運用說明，嚴厲遵循規則操作，必能得出的成果。ELISA試劑盒產品必定有運用微量加樣器加入樣本的過程。留意的要害點是：加樣不行太快，要防止加在孔壁上部，不行濺起和發生氣泡。加樣太快，無法確保微量加樣的性和均一性。加在孔壁上部的非包被區，易導致非特異吸附。濺起會對附近孔發生污染。因而一般用于檢測較強的光，如熒光檢測。而白色的酶標板就用于較弱的光檢測，常用于一般的化學發光。別的黑色的酶標板還可以消弱非特異反響帶來的問題。有些客戶會問，ELISA試劑盒用一般的酶標板可不行以進行發光檢測，回答是不行以的，由于一般從化學發光反響中發射出的光是各向同性的，也就是說各個方向上平等發射出來的。假如用通明的板子，光不只會從筆直方向發散，還從水平方向發散出來。