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上海酶聯生物研究所

ELISA試劑盒的理論與實踐

時間:2017-8-15閱讀:94
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在正式打開實驗之前,首先要了解的是理論知識。而理論與實踐都是不行短少的,今天為您說說ELISA試劑盒理論與實踐的。

已包被抗原或抗體的固相載體在低溫而且枯燥的條件下,一般能夠保存6個月,而有些不完整的試盒,僅供給包被用抗原或抗體,檢測人員需自行包被。

在ELISA測定進程中作為吸附劑和容器,不參加化學反響。可作ELISA中載體的資料許多,zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質的性能,抗體或蛋白質抗原吸附其上后仍保留本來的免疫學活性,加之它的價格低廉,所以被遍及選用。聚苯乙烯為塑料,可制成各種形式。

在ELISA中一般有兩次抗原抗體反響,即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反響的完成需求有必定的溫度和時刻,這一保溫進程稱為溫育,有人稱之為孵育,在ELISA中似不恰當。

在ELISA夾心法中,參加板孔中的標本,其間的抗原并不是都有平等的和固相抗結合的時機,只要zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。這是一個逐步平衡的進程,因而需經分散才能到達反響的結尾。在這以后參加的酶符號抗體與固相抗原的結合也相同如此。這就是為什么ELISA反響總是需求必定時刻的溫育。

從ELISA試劑盒理論來說,溫育選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體結合的合適溫度。在樹立ELISA辦法作反響動力學研討時,實驗標明,兩次抗原抗體反響一般在37℃經1-2小時,產品的生成可達。

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