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上海酶聯生物研究所

今日課堂:小細胞之大微妙

時間:2020-4-2閱讀:242
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1.收到細胞,時間要鏡檢:調查細胞形態是否正常,關于貼壁細胞則要注意看貼壁狀況是否很好,調查細胞密度,有疑議及時咨提供細胞的技術人員。因為運送的時間或許溫度的變化,許多貼壁細胞在盛滿培養基的瓶子里成長的狀況平和時會有點不一樣,主要是貼壁結實問題。

2.當通過上一步的調查,細胞初步沒有任何問題時,進行下一步操作。當收到的細胞密到達80%左右時,則處理如下:棄除瓶中大部分培養基,僅保留5到10mL培養所需的慣例培養基;或替換新鮮的培養基,置于培養箱中,隨后每天調查。細胞在低于正常成長溫度狀況下,會調整為停止期,或許慢速成長期,必須恢復37度的環境至少3個小時左右,才干重新調整到接近對數成長期的狀況,在對數成長期進行細胞的傳代會大大添加傳代的成功率,和細胞的存活率。

3.如果經步調查發現細胞密度超越90%,而且細胞狀況很好時,則復溫后2個小時需求立即傳代。傳代的比例應依據不同的細胞而定。關于成長比較快,狀況安穩,不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶。

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