當前位置:上海酶聯生物研究所>>技術文章>>酶聯生物為你解說ELISA試驗的加樣原理
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ELISA是免疫學中常用檢測辦法,在ELISA試驗進程中加樣也是極為重要的過程之一。今天,上海酶聯將為廣大科研朋友解說ELISA試劑盒試驗加樣的原理,以供我們參考:正確的加樣辦法應為45度,吸頭貼著孔壁參加,應留意視點太小,會使液體殘留在孔壁上,導致加樣不;吸頭應當貼著管壁和液面的交界處!
要留意防止呈現嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有相似過氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育進程中吸附于固相,然后與后面參加的HRP底物反響顯色。
血清標本如是以無菌操作別離,則能夠在2~8 ℃下保存一周,如為有菌操作,則主張冰凍保存。樣本的長期保存,應在-70 ℃以下。樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細菌污染,一則細菌的成長,其所排泄的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白發生分化效果;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應酶作符號的測定辦法發生非特異性攪擾。標本在保存中如呈現細菌污染所造成的的混濁或絮狀物時,應離心沉積后取上清檢測。冰凍保存的血清標本須留意防止因停電等造成的重復凍融。標本的重復凍融所發生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發生損壞效果,然后引起假陰性結果。此外,凍融標本的混勻亦應留意,不要進行劇烈振動,重復顛倒混勻即可。
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