elisa試劑盒TMB經HRP作用后,約40分鐘顯色達,隨即逐漸削弱,至2小時后即可*衰退至無色。
TMB 的中止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應中止。這類中止劑尚能使藍色堅持較長時間(12-24 小時)不褪,是目視判別的出色中止劑。
此外,elisa試劑盒各類酸性中止液則會使藍色轉變成黃色,此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。酶標比色儀簡稱酶標儀,通常指于測讀ELISA 效果吸光度的光度計。酶標儀的主要性能指標有:測讀速度、讀數的準確性、重復性、準確度和可測范圍、線性等等。
優異的酶標儀的讀數一般可準確到0.001,準確性為±1%,重復性達0.5%。酶標儀不應安頓在陽光或強光照射下,操作時室溫宜在15 -30℃ ,運用前先預熱儀器 15-30 分鐘,測讀效果更安穩。
測讀A值時,要選用產品的活絡吸收峰,如OPD用492nm 波長。elisa試劑盒有的酶標儀可用雙波長式測讀,即每孔先后測讀兩次,*次在zui適波長(W1),第2次在不活絡波長(W2),兩次測定間不 移動ELISA 板的方位,畢竟測得的A 值為兩者之差(W1-W2)。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等構成的光煩擾。
肉眼判別效果時,顯色淺不易調查,影響效果的準確性,有必要運用酶標儀檢測,以保效果一致性。
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