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為您詳解酶結(jié)合物的稀釋液及方法：
A、正確稀釋酶結(jié)合物
a）酶結(jié)合物的合適工作濃度需要通過預(yù)實(shí)驗(yàn)來確定，濃度過高易導(dǎo)致本底偏高，濃度過低則會(huì)導(dǎo)致陽性信號(hào)的減弱。
b）酶結(jié)合物在使用前稀釋，稀釋后的酶結(jié)合物不宜長期保存，因?yàn)榈蜐舛鹊拿附Y(jié)合物極易失活。
B、酶結(jié)合物的稀釋液
a）在稀釋液中常加入高濃度的無關(guān)蛋白質(zhì)(例如1%BSA或5%脫脂奶粉)，通過競(jìng)爭(zhēng)抑制酶結(jié)合物在固相載體上的非特異性吸附。
b）一般還加入能夠抑制蛋白質(zhì)吸附于塑料表面的非離子型表面活性劑，如吐溫20(0.05%的濃度較為適宜)。
結(jié)果過低有可能的原因：
A、檢查酶標(biāo)儀紫外光波長是否設(shè)置正確，此亦可能導(dǎo)致結(jié)果偏離，但不影響相對(duì)濃度。
B、仔細(xì)檢查標(biāo)準(zhǔn)品是否稀釋正確，簡(jiǎn)單的辦法是看zui低濃度的那個(gè)吸光度值是不是高于說明書的1.5倍，若高，可能有問題。
C、樣本蛋白含量高低直接影響所測(cè)濃度。
D、顯色時(shí)間過長可能導(dǎo)致OD值整體偏高以致zui高值>2.0，但此亦不影響相對(duì)濃度。

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