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ELISA試劑盒廣泛運用在免疫學查驗的各領域中,為廣大科研工作者大大節省了重復勞動的時間和精力,ELISA試劑盒系列產品豐富,并將不斷推出新產品,滿足廣大科研工作者的需要,經過不斷的完善與改進定能夠走的更久、更遠。
在實際操作中,除了選擇優良產品外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量,現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
加樣步驟中的五個技巧:
(1)盡量用排槍,做好筆記,一次做完,避免下次還要做標準。
(2)保持每次加樣的兩步要有太大的差異,所以有條件的應該考慮使用排槍。
(3)板內有氣泡可以考慮用空槍將其吸出,不過小心不能碰到底板。
(4)槍內有氣泡應該先快速打空槍,將氣泡排出。
(5)加完現色液后,放入一個可推拉的抽屜內,就可以避光振蕩了。
針對樣本收集跟保存提幾個建議:
1、標本凝固不全 ,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結果。
2、采血試管洗滌不*,反復使用易交叉污染,塑料試管能吸附抗原物質,樣本久置在塑料管內會使樣本內抗原含量下降造成假陰性。
3、嚴重溶血,以HRP 為標記的ELISA 測定中,殘留在孔內的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽性。
4、混有紅細胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內不易洗凈,如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應。
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