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上海酶聯生物研究所

ELISA試劑盒背景過高的處理方法

時間:2016-11-21閱讀:548
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ELISA試劑盒處理這個標題的一種辦法是運用雞或魚的正常血清。
好的封閉液應下降非特異性,但它不應當與抗原、抗體或檢測試劑發作相互作用。
在試驗結束時,咱們是否能取得有意義的信息,這在很大程度上取決于成果的信噪比。
請勿運用高濃度(正常濃度為0.01-0.1%),它會下降特異,發生假陰性。
這就下降了可發生信號的抗體非特異的機會。目前主要有兩種類型的封閉液:蛋白和非離子型去污劑。
您當然也期望抗體只與意圖蛋白吧。假設您一向被布景標題所困擾,那么或許您該花些時刻來優化封閉液。
假設布景過高,而您置疑洗刷不夠時,能夠測驗增加洗刷次數。
假設您的ELISA意外地碰到了高布景,那么也無需太憂慮,順次檢查ELISA體系中的組分,并掃除也許存在的標題。
ELISA試劑盒非特異的抗體會增加布景。
不過,它的缺陷在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。
為了避免這一點,切勿運用過多的一抗或二抗。
這種封閉液廉價、不亂,在去掉洗刷過程中的一些非特異上很有用。
假設濃渡過高,或許未稀釋,則會致使高布景。常用的蛋白封閉液包括牛血清白蛋白(BSA)、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。
封閉液的作用是讓不相關的蛋白占有微孔板中埋伏的位點。
ELISA試驗的原理如同很簡樸,不過乎固定抗原,增加一抗、二抗和底物,間中夾雜著洗刷和封閉。
假設您的布景過高,置疑封閉不充分,那么您能夠測驗運用更高濃度的封閉液,或適當延伸封閉時刻。
ELISA試劑盒血清組分的內涵多樣性可使它有用阻攔許多不同類型的分子相互作用。另一個挑選是運用蛋白和非離子型去污劑這兩種封閉液,后者可幫忙洗刷過程中的封閉。

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