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應按標簽說明書儲存,處于植物ELISA試劑盒的*檢測范圍。根據待測因子含量高、中、低的不同,分別采取不同的
稀釋方案:
高——指待測因子在20-200ng/ml。一般按1:100稀釋。297μι樣品稀釋液加 3μι樣品。
中——指待測因子在2-20ng/ml。一般按1:10稀釋。225μι樣品稀釋液加 25μι樣品。
低——指待測因子在31.2→2000pg/ml。按1:2稀釋。100μι樣品稀釋液加 100μι樣品。
特低——指待測因子≤31.2pg/ml。樣品一般不做稀釋,按每孔100μι樣品直接加入。
以上方案僅供參考。
樣品的稀釋應有詳細記錄
已稀釋好的 ABC 和 TMB 顯色液在加入酶標板孔前都應預先在 37℃中平衡至少 30 分鐘。試劑或樣品稀釋時,切不可忘記混勻。每次檢測都應該做標準曲線。用戶須估計樣品待測因子的含量,決定適當的稀釋倍數。
保質前使用
1.確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數目,并增加1孔作為TMB空白顯色孔。
總數=樣品數+9;做雙份檢測時×2。其余重包裝好放如冰箱中。
2.將 2000pg/ml ,1000pg/ml ,500pg/ml,250pg/ml,125pg/ml,62.5pg/ml,31.2pg/ml 的標
準品各0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1植物ELISA試劑盒孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于人血清、體液、組織勻漿或細胞培養上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品100μι。
3.酶標板加上蓋,37℃反應90分鐘。
4.反應后用自動洗板機吸去酶標板內的液體;或甩去酶標板內液體,再對著吸水紙拍幾下。
不洗。
使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的植物ELISA試劑盒不要混用。
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