免疫組化技術(shù)是當(dāng)今廣泛應(yīng)用的檢測組織切片內(nèi)特定蛋白的實(shí)驗(yàn)手段。利用圖像分析軟件來判讀切片圖像上蛋白表達(dá)程度是隨著軟件技術(shù)的發(fā)展逐步應(yīng)用到免疫組化技術(shù)中的。
     組織上的蛋白表達(dá)程度，在圖片上表現(xiàn)為免疫染色的深淺及面積大小。用肉眼只能定性地進(jìn)行判讀，zui多粗略地作一個(gè)主觀的分級(jí)評(píng)價(jià)。使用圖像分析軟件則可以對(duì)圖片染色的程度作一個(gè)定量的測量。這個(gè)測量結(jié)果與切片上的蛋白表達(dá)強(qiáng)度有理論上的線性相關(guān)性。所以能客觀定量地反映它。

在圖像分析的方法中，使用灰度來表示一個(gè)點(diǎn)的明暗程度，而圖片上一個(gè)點(diǎn)的明暗程度是與切片上免疫染色物的“光學(xué)密度（OD，Optical Density ）"決定的，再往下追蹤一步，就是與組織切片上這個(gè)點(diǎn)的蛋白表達(dá)程度決定的。這有點(diǎn)類似于分光光度計(jì)的情形，比色皿里液體樣品的吸光度與液體中吸光成分的濃度相關(guān)，符合朗伯-比爾定律。圖片上一個(gè)點(diǎn)的光密度則與該點(diǎn)上的蛋白表達(dá)程度正相關(guān)（近似為正比）。所以測量一個(gè)點(diǎn)的光密度值，就是在測量這個(gè)點(diǎn)上蛋白表達(dá)程度的一個(gè)相對(duì)的量值。

這并不是因?yàn)閳D像分析軟件測量不了圖片的光密度，而是因?yàn)樵跓晒鈭D片的拍 攝過程中，*不能把切片的熒光強(qiáng)度正確地表現(xiàn)到圖片的光密度上。zui終的定量分析結(jié)果恐怕還不如鏡下目視的判斷結(jié)果準(zhǔn)確。