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脂肪酸代謝系列_脂氧合酶LOX測試盒_微量法

參  考  價:面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號100管/48樣

品牌

廠商性質經銷商

所在地上海市

更新時間:2022-07-27 10:06:53瀏覽次數:441次

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品牌 紀寧生物 貨期 現貨供應
有效期 6個月 用途 僅供科研實驗使用
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脂肪酸代謝系列_脂氧合酶LOX測試盒_微量法

測定方法:微量法

產品規格:100管/48樣

注    意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

LOX廣泛存在于動植物組織中,催化不飽和脂肪酸氧化反應,導致膜脂過氧化。在生物體的生長發育、成熟衰老及逆境脅迫過程中具有重要作用。

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測定原理:

LOX催化氧化,氧化產物在280nm處有特征吸收峰;測定280nm吸光度增加速率,來計算LOX活性。

自備儀器和用品:

研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、可調式移液槍和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體20mL×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1支,4℃保存。

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粗酶液提取:

按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。

測定:

1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min以上,調節波長到280 nm,蒸餾水調零。

2. 在試劑三中加入10mL試劑二(振蕩混勻1min),在30℃水浴中預熱10 min以上。用不完的試劑4℃保存。

3. 對照管:依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL樣本和180μL試劑二,30℃反應30min后,記錄A對照。

4. 測定管:依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL樣本和180μL試劑三,30℃反應30min后,記錄A測定。

5. ΔA=A測定-A對照


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