脂肪酸代謝系列_磷脂酶C(PLC)測試盒_微量法
測定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣
注 意：正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義：
磷脂酶C（EC3.1.4.3）是一種水解甘油磷酸酯C3位點(diǎn)甘油磷酸酯鍵的脂類水解酶，廣泛存在于微生物及動(dòng)植物的組織和細(xì)胞中，在細(xì)胞代謝、細(xì)胞傳遞、生長發(fā)育等方面具有重要作用。
測定原理：
磷脂酶C催化水解NPPC產(chǎn)生對硝基，在410nm處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
天平、研缽、超速冷凍離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
脂肪酸代謝系列_磷脂酶C(PLC)測試盒_微量法
試劑組成和配制：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體102mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體10mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體8mL×1瓶，4℃保存。
酶液提取：
1.組織：按照質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于4℃，10000g離心5min，取全部上清于4℃、100000g離心30min，棄上清，取沉淀溶于1mL試劑一。
2.細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后于4℃，10000g離心5min，取全部上清于4℃、100000g離心30min，棄上清，取沉淀溶于1mL試劑一。
3.血清：直接測定。
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