丙酮酸(PA)含量測試盒_三羧酸循環(huán)系列
測定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
注 意：正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
丙酮酸通過乙酰CoA 連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝，起著重要的樞紐作用。
丙酮酸(PA)含量測試盒_三羧酸循環(huán)系列
測定原理：
丙酮酸在堿性溶液中呈色。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：液體50mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體5mL×1 瓶， 4℃保存；
試劑二：液體25mL×1 瓶， 4℃保存。
丙酮酸提取：
1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104 個）：提取
液體積（mL）為500~1000：1 的比例（建議500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL 提取液），超聲波破碎（冰浴，功
率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30 次），靜置30min， 8000g，25℃離心10min，取上清待測。
2、組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱取約0.1g 組織，加入1mL 提取
液），進(jìn)行冰浴勻漿，靜置30min，8000g，25℃離心10min，取上清待測。
3、血清（漿）樣品：按照血清（漿）體積（mL）：提取液體積(mL)為1：5~10 的比例（建議取0.1mL 血清
（漿）加入1mL 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿，靜置30min， 8000g，25℃離心10min，取上清待測。
測定步驟：
1、 分光光度計預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長至520nm，蒸餾水調(diào)零。
2、取300μL 樣本+100μL 試劑一于1.5mL EP 管中，混勻，靜置2min，加入500μL 試劑二，混勻，于520nm
波長處測定管吸光值A(chǔ)。
環(huán)保在線