糖代謝系列_纖維素酶(CL)
測定方法:微量法
產品規格:100管/48樣
注 意 :正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
CL(EC 3.2.1.4)存在于細菌、真菌和動物體內,能夠催化羧甲基纖維素降解,是一類可廣泛應用于醫藥、食品、棉紡、環保及可再生資源利用等領域的酶制劑。
糖代謝系列_纖維素酶(CL)
測定原理:
采用蒽酮比色法測定CL催化羧甲基纖維素鈉降解產生的還原糖的含量。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、濃硫酸和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體6mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體40mL×1瓶,4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存; 臨用前加入5mL蒸餾水和45mL濃硫酸充分溶解待用。
樣品測定的準備:
1、細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3、血清(漿)樣品:直接檢測。