山梨-醇脫氫酶(SH)測試盒_糖代謝系列
測定方法:分光光度法
產品規(guī)格:50管/48樣
注 意 :正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
SH(EC 1.1.1.14)催化山梨-醇脫氫生成果糖,是調控生物體內山梨-醇含量的關健酶之一。
山梨-醇脫氫酶(SH)測試盒_糖代謝系列
測定原理:
SH催化山梨-醇脫氫生成果糖,同時還原NAD+生成NADH,測定340nm吸光度增加速率可以計算SH活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前每瓶加入15mL蒸餾水,用不完的試劑仍4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前每瓶加入15mL蒸餾水,用不完的試劑仍-20℃保存。
粗酶液提?。?br/>
1、細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3、血清(漿)樣品:直接檢測。