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當(dāng)前位置:齊一生物科技(上海)有限公司>>技術(shù)文章>>多聚半乳糖醛酸酶活性測定樣本前處理操作-齊一生物
多聚半乳糖醛酸酶酶活測定意義
多聚半乳糖醛酸酶(EC3.2.1.15)是一種細(xì)胞壁結(jié)合蛋白,可以催化果膠分子中 α-(1,4)-聚半乳糖醛酸的裂解,參與果膠的降解,使細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)解體,導(dǎo)致果實軟化,與果實成熟、葉和花的脫落、病原物防御,細(xì)胞伸展發(fā)育以及木質(zhì)化有關(guān),在植物抗病性和食品貯藏保鮮領(lǐng)域具有較高的研究價值。
多聚半乳糖醛酸酶酶活測定原理
多聚半乳糖醛酸酶水解果膠酸生成半乳糖醛酸,具有還原性醛基,與 DNS 試劑反應(yīng)生成紅棕色物質(zhì),在 540nm 有特征吸收峰,測定 540nm 處吸光值變化可計算得多聚半乳糖醛酸酶活性。
多聚半乳糖醛酸酶酶活樣本前處理的操作
1.組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,
加入 1mL 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。16000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2.細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104 個) :提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議
500 萬細(xì)胞加入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時間 3min);然后 16000g,4℃離心 10min,取上清置于冰上待測。
3.培養(yǎng)液:直接檢測。
齊一生物是國內(nèi)生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域科研服務(wù)供應(yīng)商、自主品牌科研試劑研發(fā)生產(chǎn)商,專業(yè)從事于生物科研試劑的研發(fā)、生產(chǎn),以及課題設(shè)計咨詢、實驗技術(shù)服務(wù)。公司經(jīng)過不斷的發(fā)展,擁有自主抗體研發(fā)生產(chǎn)技術(shù)平臺。此外,公司在重大科研項目的管理及執(zhí)行上也積累了豐富的經(jīng)驗,鍛煉和培養(yǎng)了一批高素質(zhì)的科研隊伍,為客戶科研項目的順利完成提供了堅實保障。目前,齊一生物已成為國內(nèi)生物醫(yī)學(xué)科研服務(wù)領(lǐng)域內(nèi)高品質(zhì)服務(wù)的*,我們將竭誠為每位客戶提供優(yōu)質(zhì)的生物試劑產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。
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