ELISA試劑盒試驗辦法操作規(guī)范

ELISA試劑盒試驗辦法操作規(guī)范，試劑預備

在臨床試驗室，對試劑預備一般不太留意，一般的做法是，在試驗時將試劑從冰箱中拿出來即用，而疏忽了這種做法有可能影響后邊溫育時刻不行的疑問，其直接的結果是對一些弱陽性標本的檢查呈現假陰性。

加在孔壁上部的非包被區(qū)，易致使非特異吸附。

溫育所需時刻與溫度成反比，即溫度越高，則所需時刻相對較短。

因而在ELISA測定中試劑的預備zui為要害的是，在試驗開端前，將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20分鐘以上后，再進行測定，以使試劑盒在運用前與室溫平衡。這么做的意圖，主要是為了在后邊的溫育反響過程中，能使反響微孔內的溫度能較快地到達所請求的高度，以滿意測定請求。

如今的產品ELISA試劑盒中的洗板液均需在試驗室運用時對所供給的濃縮液稀釋制造，因而稀釋時所用的蒸餾水或去離子水應確保質量。此外，當試劑盒以OPD為底物時，則底物溶液應在反響顯色前暫時制造。

ELISA試劑盒試驗辦法操作規(guī)范，加血清樣本及反響試劑

在如今的ELISA產品試劑盒中，血清樣本的參加幾乎是*的要運用微量加樣器參加樣本的過程。

zui為常用的溫育溫度有37℃和室溫，其次是43℃和2～8℃。

運用微量加樣器加樣有必要留意的要害點是：加樣不行太快，要防止加在孔壁上部，不行濺起和發(fā)生氣泡。

加樣太快，無法確保微量加樣的準確性和均一性。

濺起會對鄰近孔發(fā)生污染。

呈現氣泡則反響液界面有區(qū)別。試劑的參加在國產試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加，除了要留意滴加的角度外，滴加的速度也很主要，滴加太快，很簡單呈現重復滴加或加在兩孔之間的景象，這么就會在孔內的非包被區(qū)呈現非特異吸附，然后導致非特異顯色。

有時候一份標本用一樣的試劑盒這次測定為陽性，下次測定為陰性，通常即是上述加樣及試劑的過錯所造成的。

，溫育

溫育是ELISA測定中影響測定勝敗zui為要害的一個要素。

ELISA作為一種固相免疫測定，抗原抗體的反響在固相上進行，要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*，有必要在必定的溫度條件下反響必定的時刻。